Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含已共價固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的純化蛋白 A/G 重組融合蛋白。該特殊種類的樹脂可提供通用的色譜特點組合,用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的理化性質(zhì)適用于許多親和純化系統(tǒng)。
蛋白 A/G 瓊脂糖的特點:
?蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的固定化重組融合蛋白可對幾乎任何哺乳動物物種進(jìn)行多克隆 IgG 純化
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 A/G,因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標(biāo)準(zhǔn)容量 – Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 A/G,提供大于 7 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量
Pierce 色譜純化柱與主要自動化液相色譜系統(tǒng)或手動注射器處理兼容,并直接連接至 ?KTA™ 或 FPLC 系統(tǒng),無需額外接頭。每個產(chǎn)品包括一個附件包,易于適用純化柱,與 Luer-Lok 注射器接頭或 1/16” 管配合使用。蛋白 A/G 純化柱提供快速、簡便和可重現(xiàn)的色譜分離,可再生用于多種用途。
蛋白 A/G 是一種基因工程化蛋白,結(jié)合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域。該融合蛋白在大腸桿菌中表達(dá)。蛋白A/G含有蛋白A的四個Fc結(jié)合結(jié)構(gòu)域和蛋白G的兩個Fc結(jié)合結(jié)構(gòu)域,最終分子量為50,460道爾頓(SDS-PAGE中測得為40至45kDa)。蛋白 A/G 的 pH 值依賴性低于單獨的蛋白 A,但具備蛋白 A 和 G 的累加特性。
蛋白 A/G 可與所有的人 IgG 亞類結(jié)合,因此是用于純化尚未確定亞類的多克隆或單克隆 IgG 抗體的理想選擇。此外,它還可結(jié)合IgA、IgE、IgM和IgD(后者結(jié)合力較弱)。蛋白A/G還可與小鼠所有IgG亞類結(jié)合,但不結(jié)合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此,蛋白A/G是純化和檢測小鼠IgG各亞類單克隆抗體的選擇,避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干擾。小鼠單克隆的個別亞類與嵌合蛋白 A/G 的親和力很可能強于與蛋白 A 或蛋白 G 的親和力。
Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備,該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團,從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合,并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。
Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖可結(jié)合血清、腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他抗體樣品中幾乎所有同種型和哺乳動物物種的 IgG,從而實現(xiàn)高效抗體純化。