Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖是一種適合抗體純化的通用、高性能親和樹脂。它包含純化天然蛋白 A,共價固定于高密度、高質(zhì)量的交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖中 (CL-6B)。在現(xiàn)有的許多各種形式固定化蛋白 A 親和樹脂中,本產(chǎn)品可提供通用的色譜特點組合,用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖的特點:
?天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 適用于從人、兔、豬、犬或貓血清中進行多克隆 IgG 純化
? 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),這是蛋白親和純化方法較常用的樹脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 A,因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 高容量 – Pierce 蛋白 A 瓊脂糖的這一 “Plus” 類型包含密集上樣量的固定化蛋白 A,提供大于 34 mg 人 IgG/mL 樹脂(約 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 樹脂)的結(jié)合容量
蛋白 A 是由多種菌株生成的一種細胞壁組分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結(jié)合位點,能夠與選定哺乳動物物種的 IgG 類抗體 Fc 區(qū)相互作用。IgG 結(jié)合功能在 pH 值 8.2 時,但在中性和生理緩沖液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效結(jié)合。
蛋白 A 是一種源自細菌的蛋白,對抗體(尤其是 IgG 類抗體)的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品(蛋白G)相比,蛋白A對兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結(jié)合力。蛋白A對人IgG也具有較高的結(jié)合力,但對IgG3的結(jié)合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結(jié)合作用較弱,因此不推薦用于大多數(shù)包含該抗體同種型的應(yīng)用。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備,該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團,從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合,并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白 A 的結(jié)合功能。
交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性:
?支持 pH 值穩(wěn)定性:2 至 14(短期);3 至 13(長期)
? 平均粒徑:45 至 165 微米
? 排阻極限:10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速:約1 mL/分鐘(對于1 cm 直徑柱)
?線性速度:30 cm/h
? 壓力:低于 25psi (1.5 bar);定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降(注:液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統(tǒng)壓力,而不是跨色譜柱壓降。)
更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
? 使用抗體結(jié)合蛋白進行抗體純化
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Pierce™ 蛋白 A Plus 瓊脂糖