? 分泌型報(bào)告基因檢測可在不破壞寶貴細(xì)胞的情況下進(jìn)行分析。
? 堿性磷酸酶檢測的寬動態(tài)范圍使用戶可以準(zhǔn)確測量從飛克級到納克級的酶水平。
? 與乙酰轉(zhuǎn)移酶 (CAT) 的同位素?非同位素檢測或 b-半乳糖苷酶比色?熒光檢測相比,該檢測技術(shù)的靈敏度為這兩種檢測技術(shù)的100至1,000倍,其靈敏度高于與其競爭的其他檢測技術(shù)。
? 具有寬動態(tài)范圍的高靈敏度檢測可檢測高水平和低水平的報(bào)告基因,而無需對大量樣品進(jìn)行稀釋。
? 非放射性報(bào)告基因檢測試劑盒消除了對使用放射性同位素的顧慮。
?該檢測方法能夠在大約 1 小時(shí)內(nèi)完成,實(shí)現(xiàn)快速檢測周轉(zhuǎn)。
隨時(shí)間監(jiān)測表達(dá)
Phospha-Light™ 檢測系統(tǒng)可對細(xì)胞培養(yǎng)基中分泌型堿性磷酸酶 (SEAP) 報(bào)告蛋白進(jìn)行靈敏檢測。SEAP 基因產(chǎn)物是截短型人胎盤堿性磷酸酶。分泌性報(bào)告蛋白不需要制備細(xì)胞提取物??呻S時(shí)間監(jiān)測細(xì)胞群體,使其保持完整以用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。
用于超靈敏檢測的試劑
Phospha-Light™ 檢測系統(tǒng)是優(yōu)化轉(zhuǎn)染效率的較簡單且較快速方法之一。試劑組合是 Phospha-Light™ 檢測能實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測的關(guān)鍵。系統(tǒng)包括 CSPD™ 高性能堿性磷酸酶底物、Emerald™ 化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑和專為抑制非胎盤內(nèi)源性磷酸酶活性而設(shè)計(jì)的特異性緩沖液系統(tǒng)?;瘜W(xué)發(fā)光信號的持久性輝光無需進(jìn)樣器即可使用光度計(jì)進(jìn)行測量。
應(yīng)用
。Phospha-Light™ 報(bào)告基因檢測系統(tǒng)已廣泛用于報(bào)告基因檢測,以測定已建立的細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞的基因表達(dá),包括作為基因敲低?RNA 干擾讀數(shù)方法。Phospha-Light 報(bào)告基因檢測用于廣泛的病毒功能檢測,包括病毒基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)、病毒復(fù)制、病毒融合性、病毒中和與病毒介導(dǎo)的細(xì)胞-細(xì)胞融合及病毒感染性。使用SEAP報(bào)告蛋白對報(bào)告基因的體內(nèi)檢測非常有用,通過檢測轉(zhuǎn)基因、轉(zhuǎn)染或病毒載體感染的動物血清即可。Phospha-Light 報(bào)告基因檢測系統(tǒng)已用于測量轉(zhuǎn)基因或轉(zhuǎn)染的整體動物血清中 SEAP 水平,包括小鼠、大鼠、狨猴、猴和豬血清以及雞卵尿囊液。最近,開發(fā)了小鼠 SEAP 蛋白 (mSEAP) 以提高轉(zhuǎn)基因小鼠 SEAP 的穩(wěn)定性,并且 Phospha-Light™ 系統(tǒng)已被用于 mSEAP 的靈敏檢測。有關(guān)這些和附加參考文獻(xiàn),請參閱文獻(xiàn)?資源部分中的參考書目。
僅供研究使用。不適用于診斷用途。