小隱孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書 返回列表頁

樣品 DNA 的制備：
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽性對照（以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

特點：
高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100；
操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

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反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用及效果：
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

ELISAKitforHumanDNAreplicationfactorCdt122368-21-4 20mgEupatilin HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL異澤蘭黃素；澤蘭林素

CD3e/CD3epsilon抗體,兔多抗,抗原親和純化15291-77-7HPLC≥98%A016420mg/支ELISA   IP   銀杏內(nèi)酯B

人胱天蛋白酶9(Caspase-9/MCH6/ICE-LAP6)ELISA試劑盒32451-88-0 20mg Isochlorogenic acid C 0.78-50 ng/mL異綠原酸C

LDLR/LDLReceptor抗體,兔單抗118-34-3C17H24O9Syringin≥98%ELISA   紫丁香苷

ELISAKitforHumanHLAclassIIhistocompatibilityantigen,DRB1-15betachain108657-10-95mg  Eupalinolide K 0.78-50 ng/mL野馬追內(nèi)酯K

胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)5g 250gAdenine 腺嘌呤

人血管緊張素Ⅱ1A型受體(Type-1AangiotensinIIreceptor)ELISA試劑盒480-36-4 20mgBuddleoside HPLC≥98% 7.8-500 pg/mL蒙花苷

胰蛋白胨膽鹽瓊脂（TBA）（ISO9038-1-2000）190-05535 250gWako 190-05535 Trisodium Citrate

ELISAKitforHumanPutativeRNA-bindingprotein325mg 78-5000 pg/mL斑蝥素 CANTHARIDIN(RG)

3.5%NaC1精氨酸脫羧酶發(fā)酵管Technovit3040BRTechnovit3040 印模材料（鑲嵌樹脂）

人VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒2 x 25mg 78-5000 pg/mL牛蒡?qū)贅藴势吩噭┖?BURDOCK STANDARDS KIT(P)

小鼠小膠質(zhì)細胞，MM細胞 20mg HPLC≥98%schisantherin B用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶五味子酯乙

S100A9抗體,鼠單抗520-26-3HPLC≥98%A003220mg/支FCM   IF   ICC/IF  橙皮苷

大鼠腎小管上皮細胞，RRTEC細胞 20mg HPLC≥98%Polygalasaponin V用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶瓜子金皂苷V

EpCAM/TROP-1/TACSTD1抗體,鼠單抗94596-28-8HPLC≥98%A058120mg/支ELISA   洋川芎內(nèi)酯I

人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒52286-58-5 20mg Ginsenoside Rf 78-5000 pg/mL人參皂苷Rf

小隱孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書2'-脫氧肌苷 DEOXYINOSINE, 2'-(RG)  25mg ELISAKitforHumanLysosomal-associatedtransmembraneprotein4B

歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)  25mg 人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒

洋地黃皂苷 DIGITONIN(RG)  1g ICAM-1/CD54抗體,鼠單抗

基-BSA（OVA）抗原  1 馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基

人參皂苷Rh4；參皂甙Rh4  HPLC≥98% Ginsenoside Rh4 小鼠垂體細胞 用于含量測定

洋艾素 20mg  Absinthin ELISAKitforHumanFibronectin

β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)  1g 人磷脂酰肌聚糖合成類蛋白F(PIG-F)ELISA試劑盒

原花青素A1 5mg  Procyanidin A1 人肌肽酶1(CNDP1)ELISA試劑盒