Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒提供了一種簡單的方法，可高效 (>80%) 克隆使用校正讀碼耐熱 DNA 聚合酶擴(kuò)增的平末端 PCR 產(chǎn)物。Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒使用多用途 pCR™-Blunt 克隆載體和 ExpressLink™ T4 DNA 連接酶，在五分鐘室溫連接步驟中生成一個(gè)連接產(chǎn)物。
含 pCR™-Blunt 載體的 Zero Blunt™ 克隆™試劑盒的特點(diǎn)：
•快速便捷—5分鐘室溫連接
• 高效—用于陽性選擇的 ccdB 基因可產(chǎn)生 >80% 的具有正確插入片段的克隆
• 靈活—可選擇或 Zeocin™ 抗性，實(shí)現(xiàn)靈活的抗生素選擇
pCR™-Blunt 載體提供：
•位于 PCR 產(chǎn)物插入位點(diǎn)側(cè)翼的 EcoR I 位點(diǎn)，可切除插入片段
• T7 啟動(dòng)子/引物位點(diǎn)，用于體外 RNA 轉(zhuǎn)錄和測序
• 用于測序或 PCR 篩選的 M13 正向和反向引物位點(diǎn)
Zero Blunt™ PCR 克隆如何工作
Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒設(shè)計(jì)用于在非重組的低背景下克隆平末端 PCR 片段（或任何平末端 DNA 片段）。pCR™-Blunt 載體含有與 LacZα 的 C 端融合的致死性大腸桿菌 ccdB 基因（Bernard 等人，1994）。連接平末端 PCR 片段可破壞 lacZα-ccdB 基因融合的表達(dá)，從而在轉(zhuǎn)化時(shí)僅允許陽性重組體生長。當(dāng)對轉(zhuǎn)化混合物進(jìn)行平板接種時(shí)，殺死含有非重組載體的細(xì)胞。
試劑盒配置
Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒有多種配置可供選擇：含 One Shot™ TOPO10 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌（K2700-20 和 K2700-40）以及不含感受態(tài)細(xì)胞（K2750-20 和 K2750-40），有 20 次和 40 次反應(yīng)試劑盒規(guī)格。
含 pCR™-Blunt 載體的 Zero Blunt™ 克隆™試劑盒的特點(diǎn)：
•快速便捷—5分鐘室溫連接
• 高效—用于陽性選擇的 ccdB 基因可產(chǎn)生 >80% 的具有正確插入片段的克隆
• 靈活—可選擇或 Zeocin™ 抗性，實(shí)現(xiàn)靈活的抗生素選擇
pCR™-Blunt 載體提供：
•位于 PCR 產(chǎn)物插入位點(diǎn)側(cè)翼的 EcoR I 位點(diǎn)，可切除插入片段
• T7 啟動(dòng)子/引物位點(diǎn)，用于體外 RNA 轉(zhuǎn)錄和測序
• 用于測序或 PCR 篩選的 M13 正向和反向引物位點(diǎn)
Zero Blunt™ PCR 克隆如何工作
Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒設(shè)計(jì)用于在非重組的低背景下克隆平末端 PCR 片段（或任何平末端 DNA 片段）。pCR™-Blunt 載體含有與 LacZα 的 C 端融合的致死性大腸桿菌 ccdB 基因（Bernard 等人，1994）。連接平末端 PCR 片段可破壞 lacZα-ccdB 基因融合的表達(dá)，從而在轉(zhuǎn)化時(shí)僅允許陽性重組體生長。當(dāng)對轉(zhuǎn)化混合物進(jìn)行平板接種時(shí)，殺死含有非重組載體的細(xì)胞。
試劑盒配置
Zero Blunt™ PCR 克隆試劑盒有多種配置可供選擇：含 One Shot™ TOPO10 化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌（K2700-20 和 K2700-40）以及不含感受態(tài)細(xì)胞（K2750-20 和 K2750-40），有 20 次和 40 次反應(yīng)試劑盒規(guī)格。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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