TA Cloning ™試劑盒，雙啟動子，含 pCR™II 載體，不含感受態(tài)細胞

TA Cloning™ 試劑盒雙啟動子（含 pCR™II 載體）提供了一種快速的一步法克隆策略，可將 Taq 擴增 PCR 產(chǎn)物直接插入質(zhì)粒載體中。pCR™II 載體的 T7 和 Sp6 啟動子可在體外轉(zhuǎn)錄插入片段，產(chǎn)生正義鏈或反義鏈產(chǎn)物。TA Cloning 試劑盒雙啟動子使用 pCR™II 克隆載體和 ExpressLink™ T4 DNA 連接酶，在十五分鐘的室溫連接步驟中生成連接產(chǎn)物。反應(yīng)通常產(chǎn)生 >80% 包含插入片段的重組體。

TA Cloning™ 試劑盒雙啟動子的特點：
•快速且方便 — 15分鐘、室溫連接
• 高效 — 藍/白斑篩選和 >80% 含正確插入片段的克隆體
• 靈活 — 可選擇或氨芐抗性，實現(xiàn)靈活的抗生素選擇
• 輕松 — 無需對 PCR 產(chǎn)物進行任何酶修飾
• 流程簡化 — 不需要使用包含限制性位點的 PCR 引物

pCR™II 載體提供：
• 3'-T 突出端，用于直接連接 Taq 擴增 PCR 產(chǎn)物
• T7 和 Sp6 啟動子，用于體外 RNA 轉(zhuǎn)錄和測序
• 兩側(cè)具有 EcoR I 位點的通用性多位點接頭，可方便地切除插入片段
• M13 正向和反向引物位點，用于測序

TA Cloning™ 的工作原理
Taq 聚合酶具有非模板依賴性活性，可在 PCR 產(chǎn)物的 3' 末端引入單脫氧腺苷 (A)。該試劑盒中提供的線性化載體具有單個 3' 脫氧胸苷 (T) 殘基。這使得 PCR 插入片段高效地與載體連接。

試劑盒配置
TA Cloning™ 試劑盒提供多種配置：含 One Shot™ INVF' 化學感受態(tài)大腸桿菌（K2050-01 和 K2050-40）、含 One Shot™ 0F' 化學感受態(tài)大腸桿菌（K2060-01 和 K2060-40）以及不含感受態(tài)細胞（K2750-20 和 K2750-40），分 20 和 40 次反應(yīng)試劑盒規(guī)格。