醫(yī)藥用級乳酶生原料藥國藥準字GMP認證

醫(yī)藥用級乳酶生原料藥國藥準字GMP認證

　　本品系屎腸球菌（Enterococcus　faecium）經(jīng)培養(yǎng)制成的活菌制品。每1g含活屎腸球菌數(shù)不得少于1.0×107cfu。

　　【制法要求】　本品的生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)驗證并經(jīng)國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門批準，生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和微生態(tài)活菌制品總論（《中國藥典》三部）項下的要求。生產(chǎn)用菌種來源途徑應(yīng)經(jīng)國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門批準并符合國家有關(guān)的管理規(guī)范。

　　【性狀】　本品為白色或淡黃色粉末，無腐敗臭或其他惡臭。

　　【鑒別】　（1）牛奶凝固力　取本品0.3g，加至20ml牛奶培養(yǎng)基（取新鮮牛奶或市售純牛奶，分裝至100ml離心管，于4～8℃，以每分鐘5000轉(zhuǎn)離心5～10分鐘，去除上層脂肪層;或取新鮮牛奶置沸水浴中煮30分鐘，于2～10℃放置18小時以上，使乳脂析出，取脫脂溶液。將制備好的脫脂牛奶分裝于試管中，每管20ml，于115℃濕熱滅菌20分鐘?；蛉∶撝谭?，制成10%～15%的溶液，分裝，于115℃濕熱滅菌20分鐘）中，搖勻，作為供試品管，取2管平行試驗；另取牛奶培養(yǎng)基20ml作為對照管，在37℃培養(yǎng)48小時（必要時延長至72小時）。對照管牛奶應(yīng)無凝固現(xiàn)象，供試品管牛奶應(yīng)凝固。

　?。?）染色鏡檢　自含量測定項下計數(shù)平皿中，選取具有透明圈的3～5個菌落涂片，革蘭染色，鏡檢。應(yīng)為陽性球菌，菌體呈單個、短鏈或成對排列。

　?。?）運動性檢查　自含量測定項下計數(shù)平皿中，選取具有透明圈的不同形態(tài)菌落各2個，分別接種于含量測定項下的含糖牛肉湯培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)24小時，取培養(yǎng)物，以懸滴法觀察。應(yīng)無運動性。

　?。?）酸度取鑒別（3）項下含糖牛肉湯培養(yǎng)物適量，接種于鑒別（1）項下牛奶培養(yǎng)基20ml中，作為供試品管；另取牛奶培養(yǎng)基20ml，作為對照管。分別置37℃培養(yǎng)48小時，取供試品管和對照管培養(yǎng)物各5ml，分別加水20ml和酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯淡紅色，并保持1分鐘不褪。兩者消耗氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）毫升數(shù)的差值，應(yīng)不小于2ml。

　　（5）乳酸鑒別取鑒別（4）項下供試品管和對照管的培養(yǎng)物各1ml，分別加10%硫酸溶液3～5滴，振搖，加乙M約10ml，強力振搖，放置數(shù)分鐘，取上層乙M液，置水浴中，蒸去乙M，殘渣加水2ml，搖勻，各取0.2ml，分別加硫酸2ml，搖勻，置水浴中加熱2分鐘，取出，立刻用冷水冷卻，分別滴加10%愈創(chuàng)木酚的乙醇溶液1滴，振搖。對照管應(yīng)顯橙色，供試品管應(yīng)顯紅色。

　?。?）生化反應(yīng)自含量測定項下計數(shù)平皿中，挑取具有透明圈的菌落適量，分別接種于山梨醇、L-阿拉伯糖、甘露醇、D-棉子糖生化管（取牛肉膏5g、蛋白豚5g、酵母浸膏5g、聚山梨酯800.5ml、瓊脂1.5g與1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.4ml，蒸餾水溶解并稀釋至1000ml，按0.5%加入所需糖類或醇類，分裝小試管，115℃濕熱滅菌20分鐘）中，置37℃培養(yǎng)24～48小時。山梨醇、D-棉子糖反應(yīng)呈陰性，L-阿拉伯糖、甘露醇反應(yīng)呈陽性。

　　【檢查】　干燥失重　取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過5.0%（通則0831）。

　　雜菌　取本品，照微生態(tài)活菌制品總論項下的方法檢查（《中國藥典》三部），非致病性雜菌數(shù)測定采用磷酸鹽緩沖液營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基［每1000ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（胨10.0g，氯化鈉5.0g，牛肉浸出粉3.0g，瓊脂14.0g，水1000ml，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2）中，加入磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g，溶解，混勻，分裝，121℃濕熱滅菌20分鐘］。除屎腸球菌外，1g供試品中含非致病菌性雜菌數(shù)不得過500cfu，含真菌數(shù)不得過100cfu，不得檢出大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門菌和志賀菌。

　　【貯藏】　遮光，密封，在涼暗處保存。

　　【制劑】　乳酶生片

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