泰克生物一直致力于開發(fā)單克隆抗體，在抗體開發(fā)和工程抗體所需的平臺(tái)方面擁有超過8年的經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)出了不同的抗體庫(kù)，用于抗體篩選、抗體測(cè)序、抗體人源化等。泰克生物投資了良好技術(shù)，使用復(fù)雜的工程、計(jì)算機(jī)3-D 建模和合成生物學(xué)技術(shù)生產(chǎn)定制的雙特異性抗體。從客戶的需求出發(fā)，泰克生物可以幫助客戶設(shè)計(jì)、開發(fā)和驗(yàn)證用于研究和臨床前的雙特異性抗體。
雙特異性抗體（bsAbs）是抗體含有不同的表位（通常在兩個(gè)單獨(dú)的抗原表位）即兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。通常，一種結(jié)合特異性針對(duì)靶細(xì)胞的特定細(xì)胞表面抗原，而另一種針對(duì)效應(yīng)細(xì)胞表面上的“觸發(fā)”分子，例如FcγR或CD3/T細(xì)胞受體復(fù)合物之一。
雙特異性抗體可以超越效應(yīng)細(xì)胞對(duì)其天然靶標(biāo)的特異性，并將其重定向以殺死原本會(huì)忽略的靶標(biāo)。不同的細(xì)胞毒性表達(dá)不同的觸發(fā)分子（受體）。因此，通過改變靶標(biāo)和效應(yīng)子結(jié)合域的特異性，可以針對(duì)大多數(shù)類型的靶細(xì)胞產(chǎn)生多種效應(yīng)子反應(yīng)?；蛘?，可以通過將一種結(jié)合特異性靶向血清免疫球蛋白來賦予全范圍的效應(yīng)子功能（即 ADCC、吞噬作用、補(bǔ)體激活和延長(zhǎng)的血清半衰期）。
目前，市場(chǎng)上有兩種用于治療的雙特異性抗體。由于其不同的作用機(jī)制，雙特異性抗體越來越受到關(guān)注，更多的雙特異性抗體正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)，不僅針對(duì)癌癥，還針對(duì)其他疾病。
█ 如何制備雙特異性抗體
泰克生物已經(jīng)開發(fā)了許多方法來產(chǎn)生雙特異性抗體。雜交瘤是較早用于生產(chǎn)雙特異性抗體的技術(shù)。它基于表達(dá)所需特異性鼠 IgG 的兩種不同雜交瘤細(xì)胞系的體細(xì)胞融合。然而，功能性雙特異性抗體的真實(shí)百分比是不可預(yù)測(cè)的，并且需要復(fù)雜的過程來從副產(chǎn)物中分離雙特異性抗體。
通過使用分子克隆技術(shù)，可以從同一生產(chǎn)細(xì)胞中表達(dá)兩條不同的重鏈和輕鏈組裝雙特異性 IgG 抗體。雙特異性抗體的生產(chǎn)需要至少兩個(gè)用于異二聚化重鏈的質(zhì)粒和一個(gè)用于共同輕鏈的質(zhì)?；騼蓚€(gè)輕鏈質(zhì)粒（如果使用兩條不同的輕鏈）。值得注意的是，建議在不同的質(zhì)粒上表達(dá) HC 和 LC，因?yàn)榭刂瀑|(zhì)粒比例是一種簡(jiǎn)單有效的方法，可以優(yōu)化所需產(chǎn)品的蛋白質(zhì)組裝。隨后，通常需要一個(gè)費(fèi)力且耗時(shí)的過程來從異質(zhì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染池中選擇較理想的克隆細(xì)胞系，以進(jìn)行大規(guī)?？贵w生產(chǎn)。
與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染相比，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染可以在幾天內(nèi)獲得結(jié)果，而無需將重組 DNA 整合到宿主基因組中。人類胚胎腎 (HEK293) 和基于 HEK 的 Expi 293 細(xì)胞是用于瞬時(shí)表達(dá)的人類細(xì)胞，已在bsAb 開發(fā)的早期使用。
█ 服務(wù)內(nèi)容
步驟 | 內(nèi)容 |
基因合成 | 生成多達(dá) 3 個(gè)不同設(shè)計(jì)的序列，從頭生成重組抗體 DNA 質(zhì)粒 |
小試 | 雙特異性抗體蛋白的產(chǎn)生→小規(guī)模表達(dá)到哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中→通過 SDS-PAGE驗(yàn)證→通過ELISA與重組蛋白抗原的結(jié)合分析→將克隆與親本抗體進(jìn)行比較。 |
鑒定 | 前 2 個(gè)全長(zhǎng)雙特異性抗體的表達(dá)→通過ELISA進(jìn)行結(jié)合分析→抗小鼠抗體識(shí)別的抗體的ELISA評(píng)估。 |
生產(chǎn) | 大規(guī)?？贵w生產(chǎn) |
█ 附加檢測(cè)服務(wù)
步驟 | 內(nèi)容 |
流式細(xì)胞儀分析 | FACS與抗原陽(yáng)性細(xì)胞系的結(jié)合分析 |
BLI 結(jié)合分析 | 通過 Octet 系統(tǒng)生物層干涉法進(jìn)行抗體結(jié)合親和力分析 |
Biacore TM SPR 生物傳感器 | 使用 Biacore TM SPR 生物傳感器進(jìn)行結(jié)合和動(dòng)力學(xué)分析以確定抗體親和力、Ka、Kd、KD 值 |
█ 服務(wù)優(yōu)勢(shì)
? CHO 細(xì)胞中的高蛋白表達(dá)
? 非常穩(wěn)定：在 37 °C 的血清中 >2 周
? 無溶解度問題：> 30 mg/ml
? 開發(fā)了許多不同的具有腫瘤抗原的穩(wěn)定細(xì)胞系，以驗(yàn)證許多雙特異性抗體
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