重組單克隆抗體是使用重組DNA 技術(shù)產(chǎn)生的抗體，具體是指通過(guò)DNA重組技術(shù)將抗體相應(yīng)的基因序列根據(jù)需要進(jìn)行改造和重組，并構(gòu)建在質(zhì)粒上，再通過(guò)蛋白外源表達(dá)技術(shù)將構(gòu)建好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)化入適合的宿主細(xì)胞表達(dá)獲得的抗體。重組抗體很好的解決了動(dòng)物源抗體引起的人體排斥反應(yīng)，使得抗體實(shí)現(xiàn)人源化，使抗體的效能更為完善。
泰克生物擁有完善的重組抗體表達(dá)生產(chǎn)平臺(tái)，豐富的重組蛋白和重組抗體表達(dá)經(jīng)驗(yàn)，能夠?yàn)榭蛻?hù)提供包括人源、鼠源、兔源、羊源、犬源、駝源、牛源等各種種屬的重組IgG抗體表達(dá)服務(wù)，客戶(hù)只需要提供抗體序列信息、雜交瘤細(xì)胞或cDNA，公司的技術(shù)支持可以根據(jù)客戶(hù)的需求進(jìn)行方案設(shè)計(jì)和表達(dá)體系優(yōu)化，結(jié)合公司自主設(shè)計(jì)的哺乳體系高表達(dá)載體和大規(guī)模重組抗體發(fā)酵平臺(tái)，為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的重組抗體制備服務(wù)。
重組抗體的開(kāi)發(fā)方法主要分為三類(lèi)：1. 噬菌體展示技術(shù)：通過(guò)噬菌體展示技術(shù)可以從大容量的抗體多肽庫(kù)中篩選到與特異性受體結(jié)合的高親和力的多肽。與基因重組技術(shù)結(jié)合，可以將目的基因克隆出來(lái)，通過(guò)噬菌體展示技術(shù)對(duì)表達(dá)的抗體蛋白進(jìn)行展示并篩選出特異性強(qiáng)、親和力高的抗體?？返律锟商峁┗谑删w展示技術(shù)的重組抗體生產(chǎn)，詳情可與我們聯(lián)系。2. B細(xì)胞克隆技術(shù)：通過(guò)動(dòng)物免疫，分離獲得漿細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)將其分離。擴(kuò)增篩選出的細(xì)胞基因，將其克隆到載體中，使用ELISA篩選出表達(dá)較好的克隆，對(duì)其進(jìn)行測(cè)序，從而在體外制備出重組抗體。3. 雜交瘤測(cè)序：對(duì)已制備出的雜交瘤進(jìn)所獲得的抗體進(jìn)行基因測(cè)序，利用體外重組技術(shù)表達(dá)抗體。
█ 重組抗體的制備流程
█ IgG免疫效應(yīng)
-- Fab段與抗原結(jié)合，發(fā)揮中和作用；
-- 補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒作用（CDC）：Fc段激活補(bǔ)體，形成膜攻擊復(fù)合物，能夠溶解靶細(xì)胞；
-- 調(diào)理及吞噬作用（ADCP）：Fc段可與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬作用；
-- 抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）：Fc段與自然殺傷細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合，介導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷。
█ 抗體種類(lèi)
在人類(lèi)血清中發(fā)現(xiàn)有五類(lèi)抗體，相關(guān)情況如下所示：
IgA | IgD | IgE | IgG | IgM | |
重鏈 | α | δ | ε | γ | μ |
位置 | 血管內(nèi)和分泌物 | B細(xì)胞表面 | 唾液和鼻腔分泌物中的嗜堿性細(xì)胞和肥大細(xì)胞 | 血管內(nèi)和血管外 | 主要在血管內(nèi) |
作用 | 保護(hù)粘液膜 | 不明 | 防止寄生蟲(chóng)并與過(guò)敏反應(yīng)有關(guān) | 二級(jí)免疫反應(yīng) | 初級(jí)免疫反應(yīng) |
亞類(lèi) | IgA1 IgA2 （2種） | 1 | 1 | IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 （4種） | 1 |
Fc區(qū)域結(jié)合至 | 骨髓細(xì)胞 | B細(xì)胞 | 肥大細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞 | 吞噬細(xì)胞 | B、T和NK細(xì)胞 |
IgD、IgE和IgG通常以單體形式存在，而IgA通常以二聚體形式存在，IgM以五聚體形式存在。
█ 不同IgG亞型抗體
種屬 | IgG類(lèi)型 |
人 | IgG1/2/3/4 |
小鼠 | IgG1/2a/2b/2c/3 |
大鼠 | IgG1/2a/2b/2c |
兔 | IgG |
犬 | IgG |
泰克生物可提供以上各種種屬及亞型的重組抗體制備服務(wù)。
█ 重組抗體制備的優(yōu)勢(shì)
-- 可對(duì)抗體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行一系列改造與優(yōu)化（包括人源化引入、人類(lèi)IgG1類(lèi)別的Fc區(qū)域等）從而提高抗體的親和力和穩(wěn)定性。
-- 抗原選擇更加廣泛，不受來(lái)源、純度和量的限制。
-- 無(wú)需免疫動(dòng)物，減少了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的數(shù)量和倫理問(wèn)題。
-- 所得抗體的特異性和親和力都更強(qiáng)，可用于治療和檢測(cè)等領(lǐng)域。
█ 重組抗體制備的服務(wù)內(nèi)容
流程 | 服務(wù)內(nèi)容 | 交付 |
基因合成和密碼子優(yōu)化 | 客戶(hù)可提供抗體/氨基酸序列或包含抗體基因的重組質(zhì)粒 | 1. 純化抗體 2. 表達(dá)質(zhì)粒 3. 質(zhì)檢報(bào)告 |
載體構(gòu)建 | 克隆至泰克生物高效表達(dá)載體中；抽提質(zhì)粒 | |
表達(dá)純化 | 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293/CHO細(xì)胞； 純化抗體 | |
質(zhì)檢分析 | SDS-PAGE；UV；內(nèi)毒素分析、ELISA等（可選） |
█ 服務(wù)優(yōu)勢(shì)
? 已成功表達(dá)過(guò)多物種來(lái)源（人、鼠、兔等）的全長(zhǎng)和scFv、Fab、VHH、嵌合抗體、雙特異性抗體、Fc融合抗體。
? 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)平臺(tái)：自主設(shè)計(jì)的高表達(dá)載體、優(yōu)化的自主產(chǎn)權(quán)培養(yǎng)基和專(zhuān)有的轉(zhuǎn)染試劑。
? 多個(gè)規(guī)格放大表達(dá)體系滿(mǎn)足不同客戶(hù)需求量。
? 擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，可定制個(gè)性化一對(duì)一抗體發(fā)現(xiàn)整體解決方案。
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