BD FACSAria™ III 流式具有諸多的技術,多色性能出色,其簡便易用也為更多的科研工作者打開了復雜的細胞分析的大門,成為流式歷的傳奇制作。其精心設計的液流和光路系統(tǒng),實現(xiàn)了信號檢測的。的光膠耦合石英流動池以及八角形、三角形光路收集系統(tǒng),整個系統(tǒng)具有超高的靈敏度和分辨率。
特點
液流系統(tǒng)
的多色分析及分選性能
BD FACSAria™ III的液流系統(tǒng)是由壓力驅動的。正向空氣壓力使樣本細胞通過光膠藕合的石英杯流動池。在流體力學的聚焦作用下,樣本顆粒形成單一液流通過流動池,在流動池中,激光束與樣本流正交。
光膠耦合的石英杯流動池
BD FACSAria III的核心部位是石英杯流動池,她與激光器以及光膠耦合的熒光收集光路一起構成了一套真正的穩(wěn)定性光路系統(tǒng)。為了得到更高的靈敏度,BD FACSAria III安裝了一代石英杯流動池。它的設計幫助確保激光正好聚焦到樣本流上,這樣就可以產生的信號,并收集到最多量的光信號。
穩(wěn)定性光路使開機啟動時間最短,并提高實驗的可重復性,可以自動化進行每日質控。更重要的是,它也提高了光信號收集效率,信號分辨率更好,特別適合多色應用的需求,甚至在高速分選時同樣具有光信號的高靈敏度和分辨率。
廣受贊譽的可靠性和易操作性是該系統(tǒng)的特性
除其他功能外,BD FACSAria III中一代流動池的設計進一步提高了側群細胞和細胞DNA周期分析的分辨率。
高性能分析,高性能分選
FACSAria III的分析性能,靈敏度,與水平的分析型儀器的性能等同。這是因為其運用了與BD FACSCanto™ II和BD LSRFortessa™相同的光膠耦合流動池設計和穩(wěn)定性光路結構。
這種設計的光學結構可以達到高數(shù)值孔徑光學收集。流動池和噴嘴的設計能夠使顆粒在分析區(qū)域降低流速以便收集最多光信號,之后顆粒在通過噴嘴后在液流中加速,從而進行高性能細胞分選。
由于BD FACSAria III光學和液流系統(tǒng)的精密設計,與傳統(tǒng)的空氣激發(fā)系統(tǒng)在相同的分析和分選速度時進行比較BD FACSAria III有更杰出光學檢測靈敏度。
噴嘴適應不同大小的顆粒
不同尺寸的噴嘴使用戶分選不同大小的樣本顆粒。噴嘴有四種尺寸可選:70微米、 85微米、 100微米和130微米。改進的噴嘴設計使得更換更為方便,且安裝位置精確,不會發(fā)生偏差。這意味著在每次插入噴嘴后,可以得到可重復的液滴形態(tài),不需要重新調節(jié)儀器設置,使儀器具有可重復的設置和校正狀態(tài)。軟件中包括了不同噴嘴的特異分選設置,使壓力及分選設置與使用的噴嘴相匹配。
方便的無菌設置和清洗程序
液流系統(tǒng)的創(chuàng)新,如易于插拔的噴嘴,自動化的分選設置,易于更換的濾光片等,使儀器設置更為方便和快捷。液流設計的特點包括一體化閥門組合和簡易高效的液流管路。軟件向導使無菌分選設置更簡便和高效。此外,在樣本運行后,樣本采集管內外都會自動進行沖洗,達到最小殘留,消除樣本間的交叉污染。
BD FACSAria III的四個獨立光斑
BD Accudrop技術簡化了液滴延遲時間的確定
的BD FACS™ Accudrop技術幫助使用者可以看到正確的液滴延遲值,而在以前,這是無法用肉眼實現(xiàn)的。軟件自動化操作,簡化了液滴延遲的確定。一旦液滴延遲時間被確定,系統(tǒng)會自動調節(jié)并維持恒定的斷點,此技術稱為Sweet Spot。如果遇到管路堵塞,系統(tǒng)將自動停止分選,并保護收集管。
顆粒經過流動池后液流會加速通過噴嘴,并形成分選液滴。因為顆粒的檢測在噴嘴上方,所以插入或移走噴嘴時,您都無需調整光路或液流。
光學特性
更高效的多色檢測
BD的在光學系統(tǒng)方面的革新設計能有效的檢測信號,并在多色檢測中極大的提高每個顏色通道的靈敏度和分辨率。增強的靈敏度和分辨率意味著即便信號很弱的細胞群也可以輕易地被識別和分選。
光學系統(tǒng)方便優(yōu)化多色檢測和抗體組合的設計,以求達到結果。用戶可以選擇照射樣本細胞的激發(fā)光波長,以及引導散射光和熒光信號通過特定的濾光片到達檢測器的收集光路。激發(fā)光和收集光路上的創(chuàng)新設計在減小激發(fā)光損失的同時,也顯著改善了信號收集效率,從而使每個樣本都能獲取得到良好的信號。
激發(fā)光路
激發(fā)光路的組成包括:多根引導光纖、固定波長的激光、光束整形裝置和消色差聚焦透鏡。各激光聚焦形成的光斑在空間上相互分離,并各自聚焦成形(9×65微米)。光斑聚焦越集中,熒光標記的微粒通過激發(fā)點時產生的信號就越強。光膠耦合的熒光收集物鏡能限度的將發(fā)射光從檢測點傳遞給熒光收集光路。由于光路和樣本流均固定,儀器光路的正交狀態(tài)在不同實驗、不同日期間一直保持不變。
杰出的靈敏度和分辨率
手動調校光路會因為每次調校狀態(tài)不同而導致實驗結果有變化。而固定光路設計避免了這種問題,保證儀器光路穩(wěn)定,對實驗結果不會有影響。
八角形檢測器中的光傳播路徑
收集光路
光纖將發(fā)射光從光膠耦合石英杯傳遞給檢測器接受裝置?;诎私切魏腿切卧O計的收集光路,能限度的檢測來自每個激光束照射點的信號,其原理是讓波長最長的光(光子能力)優(yōu)先透射進入個光電倍增管(PMT),并通過一系列的長通二色分光鏡將較短波長的光反射到下一個PMT下檢測器。
這一設計是根據(jù)光反射比光透射更有效率這一原理。熒光信號以反射的形式傳播到每一個PMT下檢測器,并在到達檢測器之前只通過2個濾片。因此可以在光信號損失最小的情況下完成熒光檢測。
裝置在每個PMT下檢測器之前的帶通濾鏡允許波長范圍內的熒光被收集。更重要的是,這種排列簡化了光學陣列中濾鏡和分光鏡,濾光片更易更換,而且不需要任何校準就可達到更強的信號強度。
精密的光學設計
BD FACSAria III光學系統(tǒng)方面的諸多革新設計,例如的光膠耦合石英杯、八角形檢測器和9×65μm大小的光斑,這些革新設計協(xié)同工作,以限度提高檢測靈敏度和分辨率。通過精密的設計產生出這樣一套更高效的光學系統(tǒng),使得其能夠使用較低功率激光,無需通過單純提高激光器的功率來提升實驗靈敏度和分辨率。而低功率激光又同時可以降低儀器運作的總體費用。
多色檢測
滿足當前及未來需求
對于許多用戶而言,一臺流式的性能高低取決于其靈活性,而靈活性主要表現(xiàn)在能夠同時檢測的參數(shù)數(shù)量。BD FACSAria™ III可以支持六根激光器和四個獨立光斑??蛇x的激光器包括:633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。并具有同時進行多達20個參數(shù),18色的檢測能力,有著強大的靈活性。
可升級并向下兼容
用戶可以根據(jù)當前和未來的需求以及預算情況來配置儀器。以后還可以通過升級服務來增加BD FACSAria III的激光器數(shù)量,以提升其能力。除此之外,BD FACSAria或者BD FACSAria II的用戶可以也通過升級服務獲得BD FACSAria III的新的功能。
方便日后升級,緊隨前沿技術
靈活設置你的 BD FACSAria III
最多同時安裝6個激光器,同時檢測18色,激光器可選:633, 561,488, 445, 405, 375 nm
更低的使用成本
與空氣中激發(fā)得分選方式相比,BD FACSAria III高效的光學系統(tǒng)的設計使得使用成本降低。BD FACSAria III通過光纖來傳導固體激光器所發(fā)出的激光,從而實現(xiàn)了靈敏度和分辨率的。
控制與分析
與其他BD流式細胞分析儀和分選儀兼容
無論是BD FACSAria™ III的儀器設置、數(shù)據(jù)獲取或是數(shù)據(jù)分析,BD FACSDiva™軟件都能夠提供快捷有效的控制。BD FACSDiva軟件被廣泛地應用于一系列BD的流式細胞分析和分選儀,包括BDFACSCant,和BD™ LSR系統(tǒng)等。研究者的實驗設計更為靈活方便,可以將優(yōu)化好的實驗條件和設置快速的轉移到另一平臺上。例如,分析實驗的條件和設置可以輕松應用于分選實驗。
流式細胞儀的設置和追蹤
BD FACSDiva軟件具有儀器設置和追蹤(CS&T)功能,能夠幫助儀器完成基線設置,優(yōu)化儀器的靈敏度和熒光分辨率。從而大幅減少了由于操作者的主觀誤判帶來的結果錯誤,確保實驗結果的一致穩(wěn)定。它使得用戶可以在儀器連續(xù)穩(wěn)定的前提下快速完成特定實驗的條件設置。儀器狀態(tài)追蹤功能會監(jiān)測一系列儀器設置的數(shù)值,并給出狀態(tài)報告,大大簡化了日常質控的流程。Levey-Jennings圖譜可以幫助用戶了解他們的儀器狀態(tài)確定是否需要進一步的維護處理。
流式細胞儀的設置和追蹤
分選前的快速簡單準備:
1. 打開
2. 開啟液流
3. 自動化完成儀器設置、質控和液滴延遲優(yōu)化
4. 優(yōu)化樣品條件
5..分選開始
數(shù)據(jù)獲取和分析
BD FACSDiva軟件使得科研工作者能夠使用自動的數(shù)據(jù)獲取流程去完成多個數(shù)據(jù)的預覽和保存。軟件還能夠管理數(shù)據(jù)獲取模板、實驗界面設計、以及補償程序,方便數(shù)據(jù)獲取。
為了高效便捷的分析,軟件提供了自動設門方式、用戶可選的圖形結構和批處理功能。存儲的數(shù)據(jù)可以通過圖形、門、群體層級以及統(tǒng)計結果,在同一張BD FACSDiva工作表上實現(xiàn)完整分析。一旦整體工作表被保存,可以被用來分析同一實驗中的多個樣本管數(shù)據(jù),從而大大節(jié)省時間。有助于提高效率的方式還有:用戶自定義的批處理分析、自動化的設門調整、在分析不同數(shù)據(jù)間暫停、輸出統(tǒng)計結果、在進到下一個數(shù)據(jù)文件前打印結果等等。
數(shù)字化電子系統(tǒng)
光膠耦合的石英杯流動室和電子處理系統(tǒng)協(xié)同作用下,每個檢測顆粒的信息。電子采樣速率和顆粒在流動室中的流動速度精確匹配。每秒70,000個顆粒的上樣速度下,采集到的數(shù)據(jù)保證了的線性度和精確性(見下圖)。
BD FACSAria III系統(tǒng)數(shù)據(jù)采集速率