黃熱病毒IgM抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使用說(shuō)明書(shū)
[產(chǎn)品名稱]
通用名稱:黃熱病毒IgM抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Diagnostic Kit for Yellow fever virus IgM antibody(ELISA)
[包裝規(guī)格]
96人份/盒
[用途]
黃熱病毒(YFV)IgM抗體診斷試劑盒適用于定性測(cè)定人血清或血漿中黃熱病毒IgM抗體,可作為黃熱病毒早期感染的臨床診斷指標(biāo)之一。
[檢驗(yàn)原理]
本試劑盒采用雙抗體夾心法,在預(yù)包被鼠源單抗-黃熱病毒特異性抗原復(fù)合物的反應(yīng)孔內(nèi)加入待測(cè)標(biāo)本,若標(biāo)本中有抗CHIV,則可在微孔板表面形成抗原-抗體復(fù)合物,再與酶標(biāo)二抗結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物,經(jīng)顯色系統(tǒng)顯色后,根據(jù)OD值判定有無(wú)YFV抗體的存在。
[試劑盒組成]
- 預(yù)包被反應(yīng)板 96孔×1塊
- 酶結(jié)合物 6ml×1瓶
- YFV陰性對(duì)照 0.5ml×1瓶
- YFV陽(yáng)性對(duì)照 0.5ml×1瓶
- 濃縮洗滌液 30ml×1瓶
- 樣品稀釋液 30ml×1瓶
- 顯色劑A、B液 各6ml×1瓶
- 終止液(2M H2SO4) 5ml×1瓶
- 說(shuō)明書(shū) 1份
[儲(chǔ)存條件及有效期]
試劑盒應(yīng)置2-8℃中避光保存,有效期12個(gè)月。
[適用儀器]
- 微量移液器和潔凈的吸頭
- 37℃恒溫箱或水浴鍋
- 計(jì)時(shí)器
- 洗板機(jī)
- 振動(dòng)器
- 酶標(biāo)儀 檢測(cè)波長(zhǎng)450nm,參考波長(zhǎng)630nm。
[樣本要求]
- 樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備,按照正常的采血技術(shù)收集血液,全血標(biāo)本先放置37℃處理2小時(shí),3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘以上,使血清(漿)不含或極少含血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本,樣本離心后,再室溫放置2小時(shí)以上。
- 樣品可以使用血清或者血漿,檸檬酸,肝素或EDTA等抗凝劑不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
- 樣品中含用疊氮鈉會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,高度溶血的樣品、沒(méi)有*收縮的血清樣品或者有微生物污染的樣品可能會(huì)引起錯(cuò)誤結(jié)果。
- 新鮮的樣品在2-8℃無(wú)菌條件可保存一個(gè)星期,新鮮樣品可長(zhǎng)期貯存-20℃或以下,避免反復(fù)凍融。
[檢驗(yàn)方法]
- 從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,在室溫下平衡30分鐘,同樣將濃縮洗滌液做1:20稀釋。
- 待測(cè)樣本用樣本稀釋液1:1000稀釋,每孔加入100μl,并設(shè)陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各2孔,分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl,再設(shè)空白對(duì)照1孔,置37℃溫浴60分鐘,棄去孔內(nèi)樣本,拍干。
- 洗板:
- 手工洗板:棄去反應(yīng)板條孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干;用洗滌液注滿每孔,勿溢出,靜置5-10秒,棄去孔內(nèi)洗滌液拍干,如此反復(fù)5次,拍干。
- 洗板機(jī)洗板:選擇洗滌5次的程序洗板,洗液盈注滿每孔,并確保每次吸凈無(wú)殘留,zui后在吸水紙上拍干。
- 每孔加酶結(jié)合物100μl,空白對(duì)照孔不加,貼上膠紙,置37℃孵育30分鐘,同上洗板5次。
- 每孔加顯色劑A液、B液各50μl,輕輕振蕩后,置37℃避光孵育15分鐘。
- 每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),空白調(diào)零,在酶標(biāo)儀中讀取各孔OD值(450nm/630nm)。
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