包蟲抗體檢測(cè)試劑盒使用說明書
臨床意義
包蟲病(Hydatid diseas,Hyd)由棘球絳蟲的中絳期(即包蟲)寄生機(jī)體所致,檢測(cè)特異性包蟲抗體可作為包蟲感染的輔助診斷指標(biāo)。
本試劑盒采用包蟲囊液抗原作固相抗原檢測(cè)綿羊血清中的特異性包蟲抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng)(對(duì)正常群體接近*),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
試劑組成
1.預(yù)包被板 | 48T/96T; |
| 6.樣本稀釋液(5號(hào)液) | 1支; |
2.酶結(jié)合物(1號(hào)液) | 1支; |
| 7. 終止液(6號(hào)液) | 1支; |
3.洗滌液(2號(hào)液) | 1支; |
| 8. 陽(yáng)性對(duì)照品 | 1支; |
4.底物(3號(hào)液) | 1支; |
| 9. 陰性對(duì)照品 | 1支; |
5.顯色劑(4號(hào)液) | 1支; |
| 10.使用說明書 | 1份; |
操作程序
1.加樣反應(yīng):取出所需量的反應(yīng)板條,每孔加樣本稀釋液(5號(hào)液)2滴,再分別加入待檢的血清樣本10ul,混勻。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔,陰性、陽(yáng)性對(duì)照與待檢樣本同步處理,空白對(duì)照孔僅加入樣本稀釋液(5號(hào)液)2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號(hào)液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
2.加酶反應(yīng):除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)2滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
3.顯色反應(yīng):加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色)并觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷
1.肉眼觀察:陰性對(duì)照接近無(wú)色,陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性。
2.儀器判斷:以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長(zhǎng))讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi),每次停放三十秒鐘,甩去孔內(nèi)液體。禁用自來(lái)水等其它水源。
3.為提高試驗(yàn)的可比性,建議使用儀器判讀結(jié)果。
4.如有條件,使用水浴箱孵育。