包蟲抗體檢測試劑盒使用說明書
臨床意義
包蟲病(Hydatid diseas,Hyd)由棘球絳蟲的中絳期(即包蟲)寄生機(jī)體所致,檢測特異性包蟲抗體可作為包蟲感染的輔助診斷指標(biāo)。
本試劑盒采用包蟲囊液抗原作固相抗原檢測綿羊血清中的特異性包蟲抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng)(對正常群體接近*),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
試劑組成
1.預(yù)包被板 | 48T/96T; |
| 6.樣本稀釋液(5號液) | 1支; |
2.酶結(jié)合物(1號液) | 1支; |
| 7. 終止液(6號液) | 1支; |
3.洗滌液(2號液) | 1支; |
| 8. 陽性對照品 | 1支; |
4.底物(3號液) | 1支; |
| 9. 陰性對照品 | 1支; |
5.顯色劑(4號液) | 1支; |
| 10.使用說明書 | 1份; |
操作程序
1.加樣反應(yīng):取出所需量的反應(yīng)板條,每孔加樣本稀釋液(5號液)2滴,再分別加入待檢的血清樣本10ul,混勻。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,陰性、陽性對照與待檢樣本同步處理,空白對照孔僅加入樣本稀釋液(5號液)2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
2.加酶反應(yīng):除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)2滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
3.顯色反應(yīng):加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色)并觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷
1.肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2.儀器判斷:以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.08時按0.08計算。
注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi),每次停放三十秒鐘,甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗的可比性,建議使用儀器判讀結(jié)果。
4.如有條件,使用水浴箱孵育。