ELISA試劑盒雙位點(diǎn)一步法的原理和注意事項(xiàng)

    雙位點(diǎn)一步法的原理

    Elisa試劑盒雙位點(diǎn)一步法使用識(shí)別抗原不同位點(diǎn)2個(gè)單克隆抗體（McAb）作雙抗體夾心法測(cè)定。包被一個(gè)McAb后，一起參加待檢抗原和另一個(gè)McAb酶標(biāo)物，待檢抗原上的2個(gè)抗原決定簇一起與固相McAb和酶標(biāo)McAb結(jié)合，構(gòu)成固相McAb-待檢抗原-酶標(biāo)McAb復(fù)合物，加底物經(jīng)過(guò)顯色反響進(jìn)行測(cè)定。

    雙位點(diǎn)一步法的操作過(guò)程

    1、將1個(gè)McAb與固相載體銜接，構(gòu)成固相McAb。洗刷除掉未結(jié)合物。

    2、一起參加待檢標(biāo)本和酶標(biāo)McAb，溫育，是待檢抗原和固相McAb及酶標(biāo)McAb反響構(gòu)成雙抗體夾心復(fù)合物。洗刷除掉未結(jié)合物。

    3、加底物顯色。

    雙位點(diǎn)一步法的使用

    適用于雙抗體夾心法的Elisa試劑盒，有些也可用雙位點(diǎn)一步法檢測(cè)。如HBsAg相同可用此法進(jìn)行檢測(cè)，其原理為：將純化的抗HBs吸附于固相載體外表，參加待檢血清（或血漿），一起參加辣根過(guò)氧化物酶符號(hào)的另一個(gè)抗HBs（酶結(jié)合物），如血清或血漿中含有HBsAg，則經(jīng)過(guò)溫育構(gòu)成固相McAb-HBsAg-酶標(biāo)McAb復(fù)合物，參加底物，經(jīng)過(guò)顯色反響進(jìn)行測(cè)定。若血清或血漿中不含HBsAg，經(jīng)過(guò)洗刷除掉未結(jié)合物，加底物后就不顯色。