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膠原蛋白生產(chǎn)線

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更新時(shí)間:2018-03-06 11:30:14瀏覽次數(shù):977次

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膠原蛋白生產(chǎn)線采用酶法提取膠原蛋白時(shí),必須嚴(yán)格控制提取條件。首先,酶作用時(shí)間必須適當(dāng)。如果時(shí)間過(guò)短,膠原蛋白,就不能充分釋放到提取液中,影響提取率;如果酶作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng),膠原蛋白會(huì)水解過(guò)度,產(chǎn)生過(guò)多的苦味小分子低聚肽,不僅會(huì)增加分離純化的難度,也會(huì)影響膠原 蛋白的功能特性和生物活性。

膠原蛋白生產(chǎn)線產(chǎn)品簡(jiǎn)介

由于膠原是細(xì)胞外間質(zhì)成分,在體內(nèi)以不溶性大分子結(jié)構(gòu)存在,并與蛋白多糖、糖蛋白等結(jié)合在一起,因此膠原的制備包括材料的選擇、預(yù)處理、酸堿酶鹽水法提取、不同類型膠原的分離和純化。

預(yù)處理

除膠原蛋白外,動(dòng)物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動(dòng)物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用 正丁醇或正己烷萃取出骨油。zui后除去骨中無(wú)機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的 1.0moL/LHCL脫鈣處理2d,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值1.7,37℃條件下處理120min,然后在固液 比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液(pH7.4)浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。

膠原蛋白生產(chǎn)線膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑 的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來(lái)說(shuō),高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取,但 其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。在實(shí)際提取過(guò)程中,不同提取方法之間往往相互結(jié)合,可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對(duì)原料給予高壓處理一段時(shí)間,使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性,便于分離提取。

水法

熱水提取法是將原料經(jīng)過(guò)除雜蛋白等前處理之后,在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或水提取膠原蛋白膠原蛋白水解物,使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。

酸法

酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白,主要采用低離子濃度酸性條件破壞分子酸提取膠原蛋白間 鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解,采用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒(méi)有交聯(lián)的膠原分子溶解出來(lái),也可溶解含有醛胺類交聯(lián) 鍵的膠原纖維,然后釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用低溫酸法提取的膠原zui大程度的保持了其三螺旋結(jié)構(gòu),適用于科研生物材料及原 料的制備。通常的做法是將適當(dāng)濃度的酸液按一定料液比加入到經(jīng)過(guò)預(yù)處理的骨粉中,于0~25℃攪拌提取一定時(shí)間。在采用酸法進(jìn)行膠原蛋白的提取時(shí),注意提 取溫度不宜過(guò)高,以免膠原蛋白的生物活性發(fā)生破壞。取樣經(jīng)前處理后,勻漿在低溫下用酸浸提,離心即可得酸溶性膠原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)。

產(chǎn)品說(shuō)明

作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋果酸、檸檬酸等,但大多數(shù)研究集中于乙酸抽提,像Maria Sadowska等用0.5mol/L檸檬酸在室溫下提取骨膠原蛋白,其提取率略低于乙酸提取。檸檬酸因不產(chǎn)生顏色和異味得以廣泛使用于食品工業(yè)的膠原蛋 白的提取。

酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解*,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的 不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸*水解過(guò)程中色氨酸也會(huì)全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因 此,酸法溶出生物科研膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸 (pH8.6)和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加0.05moL/L含有胃蛋白酶的檸檬酸溶液(pH2.5-3)處理一段時(shí)間,然后再用 NaCL鹽析,zui后提取率為12.35%,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在0.5moL/L醋酸條件下經(jīng)胃 蛋白酶多次消化,在4℃,20000r條件下離心20min,zui后應(yīng)用DEAE-Sephadex A-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,zui后得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。

堿法

堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧堿提取

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