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呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進口試劑盒
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  • 產(chǎn)品型號
  • 品牌
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訪問次數(shù):874更新時間:2016-06-30 17:24:37

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產(chǎn)品簡介
呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進口試劑盒貨號 99023呋喃西林檢測試劑盒Nitrofurazone (SEM) ELISA Test Kit96T美國REAGEN™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理,用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中呋喃西林(SEM)殘留的定量檢測
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產(chǎn)品介紹

呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進口試劑盒貨號 99023    呋喃西林檢測試劑盒    Nitrofurazone   (SEM) ELISA Test Kit    96T    美國REAGEN™呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理,用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中呋喃西林(SEM)殘留的定量檢測
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REAGEN呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒

RND99023

  • 概述

REAGEN呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒是利用競爭性的酶聯(lián)反應(yīng)原理,用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中呋喃西林(SEM)殘留的定量檢測。檢測肉樣時該試劑盒的前處理方法可作為與AOZ、CAP、SEM、AHD五合一前處理方法統(tǒng)一處理一個樣品,同時檢測幾個項目。該試劑盒有以下特點:

  • 高回收率(75%-105%),多種樣品的低成本提取方法。
  • 高靈敏度(0.05ppb);多樣品低檢測下限(蝦/魚/肉類0.1ppb)。
  • 高重復(fù)性。
  • 檢測過程只需要不到1.5小時。
  • 五合一處理方法更省時、經(jīng)濟、環(huán)保。

2.試劑盒原理

REAGEN呋喃西林酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理,含有呋喃西林(SEM)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時,樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM,會競爭SEM抗體,抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結(jié)合。加入底物后,產(chǎn)物的顏色強弱與樣品中SEM的濃度成反比。

呋喃西林快速檢測試劑盒_美國REAGEN進口試劑盒3. 試劑盒組成

已包被的酶標板(可拆式)                                         12×8 孔

標準液(0,0.025,0.1,0.4,1.66.4ppb)                            6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可選                                        1×0.8ml

HRP酶標抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本試劑盒應(yīng)當在2-8℃的溫度下儲存,有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒,

請將SEM-HRP酶標抗原放置-20℃或者冰凍保存。

4.檢測限

檢測物質(zhì)

檢測下限(ng/g)

飼料

0.1

魚/蝦/肉

0.05

雞蛋/蛋粉

0.05

蜂蜜

0.05

牛奶

0.05

血清

0.05

尿樣

0.05

5.交叉反應(yīng)

交叉反應(yīng)物質(zhì)

交叉反應(yīng)率(%)

呋喃西林SEM

100%

呋喃唑酮AOZ

<0.04%

呋喃妥因AHD

<0.06%

呋喃咜酮AMOZ

<0.05%

6.未提的設(shè)備或材料

  • 酶標儀(450 nm)
  • 恒溫培養(yǎng)箱
  • 勻漿器
  • 蒸干器
  • 漩渦振蕩器
  • 移液槍(50,100mL,1mL各一支)
  • 多道移液器(50-300mL)
  • 乙酸乙酯
  • 0.1M K2HPO4
  • 正己烷

7.注意事項

實驗前請閱讀以下文字,以保證獲得實驗效果。

  • 標準品中含有呋喃西林,請小心使用。
  • 不要使用過期的試劑盒。
  • 不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
  • 盡量保持室溫20-25℃,避免在通風口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的,不要在陽光直射下實驗,防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
  • 水質(zhì)量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水。
  • 加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。
  • 孵育時間的計算越規(guī)范越好,保持添加標準品的*性,先添加標準品后添加樣品。
  • 從低濃度到高濃度地添加標準品,降低影響標準品曲線質(zhì)量的風險。
  • 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存。

8.樣品的準備

確保樣品的正確保存,一般來說,樣品在2-4只能保存1-2天,如果要保存更長時間,就要保存在-20冷凍保存,在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內(nèi)解凍。

1×樣品提取液

按1:9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。

1)飼料(用于檢測添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動物組織的SEM)

  • 取0.5g勻質(zhì)樣品,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,渦旋振蕩1min;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時,在培養(yǎng)期間,每1h振蕩5秒;
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH,6 mL 乙酸乙酯,zui大轉(zhuǎn)速渦旋震蕩1min
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL乙酸乙酯上清液(含0.25g初始樣品)到另一試管(避免觸及下層水相!如果

移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;

  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品提取液,zui大轉(zhuǎn)速渦旋振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

稀釋倍數(shù):4.0

2)魚/蝦/肉(牛肉/雞肉/豬肉):可用于五合一前處理方法

  • 稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛,渦旋震蕩30秒;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3h,培養(yǎng)期間,每1h振蕩5秒;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH, 6 mL 乙酸乙酯,渦旋震蕩振蕩30s;
  • 室溫下(20-25℃)4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,上清液不足3mL,請85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;(注:肝臟組織富含脂肪、色素等,為防止乳化現(xiàn)象,建議選用4mL正己烷溶解,渦旋震蕩30秒后,再進行下一步操作)
  • 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩1分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

注意:為了避免過高的背景值,建議用空白樣品做平行,從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

稀釋倍數(shù):2.0

 

3)雞蛋

  • 稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩30秒;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時,在培養(yǎng)期間,每1h振蕩5秒;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH, 6 mL 乙酸乙酯,渦旋震蕩振蕩30s;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮氣吹干;
  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品抽提工作液體,劇烈振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100µL下清液,進行樣品測試。

稀釋倍數(shù):2.0

注意:為了避免過高的背景值,建議用空白樣品做平行,從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

4)蜂蜜

  • 稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

稀釋倍數(shù):2.0

 

5)牛奶

  • 對于含脂牛奶,取待測牛奶樣品3ml室溫4000g,5min。除去上層脂肪層。(對于脫脂奶粉,次步略)
  • 取1ml樣品,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH,6 mL 乙酸乙酯,zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min;室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

     稀釋倍數(shù):2.0

6)血清

  • 稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移

取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;

  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品提取液,劇烈
  • 振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;

 

  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

     稀釋倍數(shù):2.0

7)尿樣

  • 取3ml尿樣,4000g離心5min。
  • 離心后稱取1ml,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
  • 50°C恒溫培養(yǎng)3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
  • 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,zui大轉(zhuǎn)速振蕩1min;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
  • 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
  • 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
  • 室溫下4000g離心10分鐘;
  • 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。

稀釋倍數(shù):2.0

10檢測步驟

試劑的準備

注意:試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時,確定在使用前閱讀過注意事項。準備適量的檢測用試劑,所有的試劑搖勻后使用。準備足夠所有小管所需的用量,不能將試劑倒回原來的瓶子中,處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風險。齊一生物科技歡迎您訂購咨詢.手機.在線咨詢:1091367877                                  其它產(chǎn)品貨號 99030    巴氏消毒驗證檢測試劑盒    Pasteurization Verification Test Kit    96T    美國REAGEN
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