當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> AS6321297土壤過氧化物酶(SPOD)測試盒(比色法)
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 100管/96樣、50管/48樣 |
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級別 | 其他 |
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321297 | 土壤過氧化物酶(SPOD)測試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS6321297 | 土壤過氧化物酶(SPOD)測試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測定意義:
S-POD主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。
測定原理:
S-POD催化有機(jī)物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。
自備用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、乙50mL(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:粉劑×2瓶,4℃保存;臨用前取一瓶,加入6mL蒸餾水充分溶解后待用;用不完的試劑4℃保存一周。
試劑二:液體2.5mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體6mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:乙50mL×1瓶,4℃保存;(自備)
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
測定步驟:
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至430nm,蒸餾水調(diào)零。
加樣表
試劑名稱 | 測定管 |
風(fēng)干土樣(g) | 0.02 |
試劑一(μL) | 100 |
試劑二(μL) | 20 |
振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng)1 h
試劑三(μL) | 50 |
試劑四(μL) | 430 |
振蕩數(shù)次,25℃室溫靜置30min,吸取200μL上層液于430nm處測定吸光值A(chǔ)
(注意:1、因乙粘度小,易掉液,吸取前需先將槍頭在上層液里潤洗2~3次,再轉(zhuǎn)移測定;2、乙易揮發(fā),轉(zhuǎn)移到96孔板后立即測定,最好一個一個測定)。
S-POD活力計算
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 8.97x -0.003;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值A(chǔ)。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-POD活力(mg/d/g 土樣)=(A+0.003) ÷8.97×V反總÷W÷T=80×(A+0.003)
T:反應(yīng)時間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積0.6mL;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 4.485x -0.003;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值A(chǔ)。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-POD活力(mg/d/g 土樣)=(A+0.003) ÷4.485×V反總÷W÷T=160×(A+0.003)
T:反應(yīng)時間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積0.6mL;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
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