細(xì)胞簡(jiǎn)介
人胚腎細(xì)胞株293插入SV40 T-抗原基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。該細(xì)胞最初的名字293tsA1609neo，攜帶SV40復(fù)制序列，被廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因表達(dá)和蛋白表達(dá)。
運(yùn)輸和保存
1．1 mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收貨后-80℃冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇。若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)揮發(fā)干凈、凍存管蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2．T25瓶培養(yǎng)的細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
培養(yǎng)信息
細(xì)胞名稱 | 293T，HEK-293T，人胚腎細(xì)胞 |
別稱 | Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo |
種屬來源 | Homo sapiens, human |
組織來源 | kidney; Embryo |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
生物安全等級(jí) | 1級(jí) |
傳代比例 | 1:3-1:5 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | 10% FBS、高糖DMEM、1% Penicillin-Streptomycin |
培養(yǎng)條件 | 氣相：95% 空氣、5% CO2；溫度：37℃ |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO；液氮 |
支原體檢測(cè) | 陰性 |
STR鑒定結(jié)果 | D5S818: 8,9 D13S317: 12,14 D7S820: 11 D16S539: 9,13 vWA: 16,19 THO1: 7,9.3 Amelogenin: X TPOX: 11 CSF1PO: 11,12 |
培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1．293T貼壁能力較弱，加液、換液、洗滌時(shí)，須動(dòng)作輕柔，避免用液體直沖細(xì)胞，會(huì)造成細(xì)胞脫落。細(xì)胞生長(zhǎng)不能過密，過密細(xì)胞容易脫落，脫落下來的細(xì)胞可以通過離心收集，消化后繼續(xù)培養(yǎng)。
2．293T細(xì)胞狀態(tài)直接影響病毒包裝效率。當(dāng)細(xì)胞傳代次數(shù)過多、細(xì)胞增殖速度減緩、細(xì)胞貼壁能力非常弱（輕柔換液也能導(dǎo)致細(xì)胞半數(shù)脫落）時(shí)，說明細(xì)胞狀態(tài)不好，會(huì)大幅降低病毒包裝效率。
3．使用高糖DMEM培養(yǎng)293T，低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培養(yǎng)基可能影響293T細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
4．如果發(fā)生293T細(xì)胞不貼壁，漂浮在培養(yǎng)基中的現(xiàn)象，請(qǐng)確認(rèn)所使用的DMEM中 NaHCO?濃度及培養(yǎng)箱中CO2濃度。并參考以下培養(yǎng)體系：
① DMEM由1.5 g/L NaHCO? 配制而成，使用5% CO2培養(yǎng)箱。
② DMEM由3.7 g/L NaHCO?配制而成，使用10% CO2培養(yǎng)箱。
當(dāng)使用 NaHCO?含量高的培養(yǎng)基時(shí)，必須將這些細(xì)胞在10% CO2中孵育，以便正確緩沖培養(yǎng)基。當(dāng)培養(yǎng)基沒有適當(dāng)緩沖時(shí)，293T細(xì)胞雖然可以存活，但將無法粘附并保持漂浮在培養(yǎng)基中。
5．培養(yǎng)時(shí)可酌情使用預(yù)鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿，若細(xì)胞狀態(tài)好，可省略此步驟。
6．本細(xì)胞僅用于科學(xué)研究，不得用于臨床治療。
7．請(qǐng)注意無菌操作，避免污染。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
JY03011/JY03012 | 慢病毒濃縮試劑盒 | 50 mL/100 mL |
JY03013/JY03014 | PEG-8000慢病毒濃縮液 | 50 mL/100 mL |
JY03021/JY03022/JY03023 | 慢病毒包裝劑盒 | 10T/20T/40T (10cm dish) |
JY03024/JY03025/JY03026 | 慢病毒包裝質(zhì)粒Mix | 100 μg/200 μg/400 μg |
JY03061/JY03062 | 全套第二代慢病毒包裝質(zhì)粒（三質(zhì)粒系統(tǒng)） | 1 μg/100 μg per plasmid |
JY03063/JY03064 | 全套第三代慢病毒包裝質(zhì)粒（四質(zhì)粒系統(tǒng)） | 1 μg/100 μg per plasmid |
JY03027/JY03028 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 pMD2.G | 1 μg/100 μg |
JY03029/JY03030 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 psPAX2 | 1 μg/100 μg |
JY03031/JY03032 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 pCMV-VSV-G | 1 μg/100 μg |
JY03033/JY03034 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 pCMV-dR8.91 | 1 μg/100 μg |
JY03035/JY03036 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 pMDLg/pRRE | 1 μg/100 μg |
JY03037/JY03038 | 慢病毒包裝質(zhì)粒 pRSV-Rev | 1 μg/100 μg |
JY04013/JY04014 | RNA退火緩沖液（5×） | 2 mL/5 mL |
JY04011/JY04012 | DNA退火緩沖液（5×） | 2 mL/5 mL |
JY02066/ JY02088 | 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 P2 P3 | 1×10? cells |
JY05021/JY05022/JY05023 | PKH26試劑盒 細(xì)胞膜、囊泡、外泌體標(biāo)記 | 0.1 mL/0.2 mL/0.5 mL |
JY03041 | 293T，HEK-293T，人胚腎細(xì)胞 | > 1×10? cells |
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