產(chǎn)品咨詢:
鴨禽流感病毒抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:鴨禽流感病毒抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Test Kit for Duck Antibody to Avian Influenza Virus (ELISA)
【包裝規(guī)格】48份/盒、96份/盒
【預(yù)期用途】禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus ,AIV)引起的一種禽類急性高度致病性傳染病。本病以急性敗血性死亡到無(wú)癥狀帶毒等多種病癥為特點(diǎn),禽類感染后體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性抗體。檢測(cè)特異性禽流感病毒抗體可作為該病疫苗免疫狀況及該病輔助檢測(cè)指標(biāo)。本試劑盒采用ELISA方法檢測(cè)鴨血清中的特異性抗禽流感病毒抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
【主要組成成份】
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1. 2~8℃避光保存,防止冷凍,有效期為12個(gè)月。
2. 包被板開(kāi)封后2~8℃避光保存,使用期限為15天。
【適用儀器】
含450nm和630nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀;37℃恒溫設(shè)備;可調(diào)微量移液器。
【樣本要求】
1. 為取得*實(shí)驗(yàn)效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長(zhǎng)菌以及嚴(yán)重溶血的樣品;
2. 短期(7天)將進(jìn)行檢測(cè)的血清樣品可存放于2~8℃;如需長(zhǎng)期保存,應(yīng)置于-20℃或以下,避免反復(fù)凍融。
【檢驗(yàn)方法】
1. 洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號(hào)液)按1:10稀釋(如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水),充分混勻即為工作洗滌液。
2. 樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清按1:100稀釋(如5μl血清+495μl樣本稀釋液),充分混勻。 陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋,直接加樣。
3. 加樣反應(yīng):每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100μl)。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100μl。37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘;zui后一次甩凈,拍干。
4. 加酶反應(yīng):除空白對(duì)照孔外,其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)1滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
5. 顯色反應(yīng):加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。
6. 終止反應(yīng): 加終止液(6號(hào)液)1滴,以空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm波長(zhǎng)(630nm作為參比波長(zhǎng))讀取OD值。
【參考值】
1. Cut-off 值 (COV)=陰性對(duì)照平均OD值×2.1 (陰性對(duì)照孔OD值<0.08時(shí)按0.08計(jì))。
2. 有效性判定:
空白對(duì)照孔OD值<0.05(若大于0.05則實(shí)驗(yàn)無(wú)效);
陰性對(duì)照孔OD值≤0.10(若大于0.10則實(shí)驗(yàn)無(wú)效);
陽(yáng)性對(duì)照孔OD值≥0.30(若小于0.30則實(shí)驗(yàn)無(wú)效)。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
樣本OD值≥COV值時(shí),判為禽流感病毒抗體陽(yáng)性;
樣本OD值<COV值時(shí),判為禽流感病毒抗體陰性。
【檢驗(yàn)方法的局限性】本試劑僅適用于檢測(cè)鴨血清。
【注意事項(xiàng)】
1. 包被板須密封防潮。從冷藏環(huán)境中取出時(shí),應(yīng)平衡至室溫后,方可開(kāi)封啟用。未使用完的板條應(yīng)即時(shí)放回有干燥劑的自封袋中,4℃密封保存。
2. 滴加試劑前應(yīng)將滴瓶輕搖、混勻,首滴棄去;滴加試劑時(shí)瓶身應(yīng)保持豎直。
3. 瓶蓋每次使用后要蓋緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。
4. 孵育時(shí),推薦使用水浴箱。如無(wú)水浴箱,可取密封濕盒放入37℃溫箱內(nèi)使用。
5. 用棄的試劑盒及樣本都應(yīng)按污染物妥善處理。試劑盒內(nèi)終止液有腐蝕性,須小心使用。
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