海腎-螢火蟲(chóng)熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn):
•同時(shí)—對(duì)兩種熒光素酶活性同時(shí)進(jìn)行基于過(guò)濾器的波長(zhǎng)分離檢測(cè)
• 靈敏—測(cè)量同一樣品中的綠色海腎和紅色螢火蟲(chóng)熒光素酶活性
• 快速—與傳統(tǒng)的序貫雙測(cè)定不同,無(wú)需淬滅步驟
• 多重分析—可以對(duì)同一樣品中的兩種細(xì)胞活性進(jìn)行定量
Pierce 海腎-螢火蟲(chóng)熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的測(cè)定,支持同時(shí)檢測(cè)海腎和紅色螢火蟲(chóng)熒光素酶活性。海腎熒光素酶充當(dāng)一個(gè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因,以組成型活化的紅色螢火蟲(chóng)作為一種歸一化對(duì)照。如以下動(dòng)畫(huà)視頻所示,該報(bào)告基因?qū)φ战M合可在單次讀碼測(cè)定中同時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因和對(duì)照熒光素酶的活性,無(wú)需雙步驟添加底物試劑或淬滅。該測(cè)定工作溶液包含兩種熒光素酶的底物,且在反應(yīng)的同時(shí)出現(xiàn)閃光型動(dòng)力學(xué)。所產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)可以使用過(guò)濾器進(jìn)行光譜解析。在單個(gè)樣品中,研究人員可以測(cè)定調(diào)節(jié)元素的轉(zhuǎn)錄活性、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及活化劑或抑制劑的影響。
包括:
細(xì)胞裂解緩沖液、反應(yīng)緩沖液以及底物腔腸素和 D-螢光素
需要:
綠色海腎和紅色螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因;濾光片組的波長(zhǎng)為 525±20nm(對(duì)于綠色海腎 Luc)和 615 至 675nm(對(duì)于紅色螢火蟲(chóng) Luc)。光度計(jì)或其他能夠監(jiān)測(cè)發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光微孔板讀數(shù)儀);一次評(píng)估超過(guò) 24 孔所需的進(jìn)樣器。
應(yīng)用:
•同時(shí)研究?jī)煞N調(diào)節(jié)元素
• 同時(shí)監(jiān)測(cè)兩條信號(hào)通路
• 每次篩選可研究多個(gè)靶標(biāo)(例如脫靶效應(yīng))
綠色海腎熒光素酶可產(chǎn)生比螢火蟲(chóng)和天然海腎熒光素酶更明亮的生物發(fā)光信號(hào)。綠色海腎熒光素酶蛋白產(chǎn)生的生物發(fā)光信號(hào) (λmax= 535nm) 是由腔腸素氧化引起的。第二項(xiàng)測(cè)定使用紅色螢火蟲(chóng)熒光素酶是日本源氏螢火蟲(chóng)熒光素酶源氏螢的突變形式。該熒光素酶產(chǎn)生了一種紅移輻射光譜 (λmax= 613nm),它是由 D-熒光素在 ATP 存在的情況下氧化引起的。
更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
• 熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定的同步雙發(fā)射檢測(cè)
相關(guān)產(chǎn)品
Pierce™ 海腎螢火蟲(chóng)熒光素酶雙檢測(cè)試劑盒