流行性腮腺炎ELISA檢測試劑盒 使用說明書

流行性腮腺炎ELISA檢測試劑盒 使用說明書
僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人流行性腮腺炎（EP）的含量。

l有效期：6個月

l保存條件：2-8℃

[實驗原理]

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人流行性腮腺炎（EP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人流行性腮腺炎（EP）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

[樣本處理及要求]

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注：標本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

[需要而未提供的試劑和器材]

1.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

[試劑盒組成]

什么是流行性腮腺炎?

流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒所引起的急性呼吸道傳染病，傳染性強，可以通過唾液或者口、鼻及咽喉黏膜傳播。

傳播途徑：主要通過呼吸道飛沫傳播，也可通過直接接觸感染者的唾液傳播

以腮腺非化膿性炎癥、腮腺區(qū)腫痛（局部灼熱而不紅）為主要臨床特征，大多數(shù)無明顯前驅(qū)期癥狀，少數(shù)伴全身不適、肌肉酸痛、頭痛、食欲不振、畏寒發(fā)熱。潛伏期一般為8-30天，平均為18天。

腮腺炎病毒除侵犯腮腺外，還可侵犯神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等多系統(tǒng)，嚴重可致生育力受損、耳聾、視力障礙等后遺癥，或危及生命。

不過，絕大多數(shù)流行性腮腺炎預(yù)后良好，很少發(fā)生心肌炎、病毒性腦炎等危及生命的并發(fā)癥。

這個時間段傳染性*強

早期感染者和隱性感染者是流行性腮腺炎的主要傳染源。

對腮腺炎病毒未建立免疫力的人群普遍易感。兒童及青少年人群（5-9歲）、免疫力受損人群感染風(fēng)險相對較高。

在腮腺腫大前6天至發(fā)病后9天均具有傳染性，但在發(fā)病前一兩天至發(fā)病后5天傳染性*強。

雖然流行性腮腺炎主要經(jīng)呼吸道飛沫傳播，但間接接觸被病毒污染的物品也會造成傳播。

值得注意的是，孕產(chǎn)婦感染者也可通過胎盤傳至胎兒，導(dǎo)致流產(chǎn)、胎兒發(fā)育畸形。

接種疫苗，做好預(yù)防

接種含腮腺炎成分的疫苗，是控制和預(yù)防流行性腮腺炎*有效的手段。