探針法鸚鵡熱衣原體族實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Chlamydia psittaci cluster
貨號(hào):Cqt-psi-20 規(guī)格:20個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Cqt-psi-50 規(guī)格:50個(gè)反應(yīng)
貨號(hào):Cqt-psi-100 規(guī)格:100個(gè)反應(yīng)
儲(chǔ)存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反復(fù)凍融。
試劑盒特點(diǎn):
1, 特異性檢測鸚鵡熱衣原體族,與沙眼衣原體及其他生物基因組無交叉反應(yīng)。
2, 靈敏度高,最-低檢測極限約為80個(gè)拷貝/反應(yīng)。
3, DNA聚合酶采用熱啟動(dòng)方式,可抑制非特異性擴(kuò)增,降低背景熒光。
4, 帶有陽性對(duì)照樣品,可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。
5, 帶有UDG酶和dUTP,可降低殘留DNA的污染。
鸚鵡熱衣原體(Chlamydia psittaci),或稱鸚鵡熱嗜衣原體/鸚鵡熱親衣原體(Chlamydophila psittaci)、鸚鵡衣原體,是一種嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核生物,屬于衣原體科(Chlamydiaceae)。鸚鵡熱衣原體是最-早發(fā)現(xiàn)的衣原體,宿主非常廣泛,不僅有包括鸚鵡在內(nèi)的多種鳥類,還有許多哺乳動(dòng)物;在許多宿主中已形成獨(dú)-特的亞型,包括:A–F, M56和WC,每種亞型都具有嚴(yán)格的宿主特異性:A亞型宿主為鸚鵡科鳥類,B亞型宿主為鴿,C亞型宿主為鴨和鵝,D亞型宿主為火雞,E亞型宿主為鴿、鴨及其他鳥類,F(xiàn)亞型宿主為鸚鵡,WC亞型宿主為牛,M56亞型宿主則為嚙齒類動(dòng)物。另外還有一部分亞型,根據(jù)16S和23S rRNA序列的差異,被劃分為獨(dú)立物種,如:流產(chǎn)衣原體(Chlamydia abortus)、貓衣原體(Chlamydia felis)、豚鼠衣原體(Chlamydia caviae)和獸類衣原體(Chlamydia pecorum)等。這些衣原體有些可以感染人類:鸚鵡熱衣原體感染人類后可引起類似流感的癥狀,有時(shí)會(huì)發(fā)展為嚴(yán)重肺炎、心內(nèi)膜炎或腦炎;流產(chǎn)衣原體可引起人類流產(chǎn)和呼吸功能紊亂;貓衣原體可引起人類的結(jié)膜炎;豚鼠衣原體可能引起人類肺炎。獸類衣原體尚無感染人類的報(bào)道。
鸚鵡熱衣原體可使用培養(yǎng)法和血清學(xué)方法進(jìn)行檢測。鸚鵡熱衣原體在雞胚卵黃囊及HeLa細(xì)胞、猴腎細(xì)胞培養(yǎng)中易于生長,但由于耗時(shí)費(fèi)力,且需要實(shí)驗(yàn)室安全等級(jí)較高,因此培養(yǎng)法很少使用。一些血清學(xué)方法,如:補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)技術(shù)、ELISA、微量免疫熒光法,常用于檢測鸚鵡熱衣原體,其缺點(diǎn)在于可能產(chǎn)生交叉反應(yīng),且靈敏度較低,不適用于早期感染,一般只能用作回顧性診斷。PCR法是一種體外酶促合成特異性DNA 片段的方法,更適合檢測鸚鵡熱衣原體,其靈敏度高,且特異性強(qiáng),檢測速度快,只需兩三個(gè)小時(shí)即可完成。定量PCR法與普通PCR法相比,操作更為方便,更少受環(huán)境污染的影響。
探針法鸚鵡熱衣原體族實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒采用探針法定量PCR,針對(duì)胞膜外蛋白基因的保守序列設(shè)計(jì)引物,特異性識(shí)別鸚鵡熱衣原體、流產(chǎn)衣原體、貓衣原體、豚鼠衣原體、Chlamydia buteonis和Chlamydia ibidis;這幾種衣原體均與鸚鵡熱衣原體親緣關(guān)系很近或曾歸屬于鸚鵡熱衣原體,而與沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis)親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。經(jīng)BLAST驗(yàn)證,本試劑盒與其他生物基因組沒有交叉反應(yīng)。使用本試劑盒檢測了不同的衣原體,以及親緣關(guān)系較近或者較常見的22種細(xì)菌,均未發(fā)現(xiàn)非特異性信號(hào),沙眼衣原體、肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae)和獸類衣原體均不能產(chǎn)生特異性信號(hào);對(duì)18個(gè)臨床樣本(包括痰、喉-拭子和支氣管沖洗液)進(jìn)行檢測,獲得8個(gè)陽性,靈敏度高于ELISA法(6個(gè)陽性),與臨床診斷結(jié)果一致;對(duì)源于鴿的9個(gè)鼻-拭子樣本進(jìn)行檢測,獲得3個(gè)陽性。本試劑盒適用于鸚鵡熱衣原體族的檢測。
本產(chǎn)品僅供研究使用。
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