501蜂蜜中羥甲基糠醛含量檢測高效液相色譜儀
GB/T 6682-1992
蜂蜜中羥甲基糠醛含量的液相色譜測定方法,檢出限1.0mg/kg,蜂蜜樣品中的羥甲基糠醛經(jīng)HPLC反相色譜柱分離,用液相色譜儀紫外檢測器檢測,通過色譜軟件來收集圖譜、查看標準曲線外標法定量。本方法使用我公司500系列高效液相色譜儀系統(tǒng)來檢測,檢測精度滿足GB/T6682-1992要求。
1 檢測條件
1.1 甲醇:色譜純。
1.2 甲醇溶液:10%,吸取100ml,的甲醇到1000 ML的容量瓶中,用水稀釋至刻度。
1.3 標準物質(zhì):羥甲基糠醛純度≥99%,
1.4 標準儲備溶液:準確稱取適量的羥甲基糠醛標準物質(zhì)于100mL容量瓶,用10ml,甲醇溶解,用水稀釋至刻度,配成0.20mg/mL的標準儲備液。此溶液可在溫度低于4℃冰箱中冷藏保存兩個月。
1.5 標準工作溶液:分別吸取適量的羥甲基糠醛標準儲備溶液至100mL容量瓶中,用10%甲醇溶液釋稀至刻度,配成0.10ug/mL,0.20ug/mL,1.0ug/mL,2.0ug/mL,4.0ug/mL,6.0ug/mL,10ug/ml,標準工作溶液
2 儀器
2.1 501高效液相色譜儀(杭州賽析科技):配全波長紫外檢測器。
恒流泵:耐壓42Mpa,流速精度0.001ml/min
內(nèi)置式專用色譜軟件,可做外標法,能兼容XP操作系統(tǒng),RS-232接口
2.2 分析天平:感量0.01g,
2.3 注射器:10mL,微量進樣器
2.4 過濾膜:0.45um,一次性針式過濾器
2.5 SX-01超聲波清洗器、SX-01溶劑過濾器、AP-01真空泵
2.6 色譜柱溫箱
3 試樣制備與保存
3.1 試樣的制備
無論有無結(jié)晶的實驗室樣品,都不要加熱。將其攪拌均勻,分出0.5kg作為試樣。制備好的試樣置于樣品瓶中,密封,并做上標記。
3.2 試樣的保存
將試樣于室溫下保存。
4 測定步驟
4.1 試樣處理
稱取10g試樣,精確至0.01g,置于100mL燒杯中,加人10m L甲醇(1.2),用玻璃棒輕輕攪拌均勻,使試樣*溶解。轉(zhuǎn)移至l00mL容量瓶中,用水釋稀至刻度,充分混勻。用0.45u m的濾膜過濾,濾液用于液相色譜儀紫外檢測器測定。
4.2 色譜側(cè)定
4.3 液相色譜條件
a) 色譜柱:Vertex C18 5um,250mmX4.6 mm(i.d )或相當者(美國進口);
b) 流動相:甲醇+水(10十90);
c) 流速:1.0 m L/min;
d) 檢測波長:285n m;
e) 柱溫:30度
f) 進樣量:10uL.
4.4 液相色譜測定
首先測定七個標準工作溶液(1.5)在上述色譜條件下的峰面積,以峰面積對相應(yīng)濃度繪制標準工作曲線,然后測定未知樣品,用標準工作曲線對樣品進行定量。樣品溶液中羥甲基糠醛的響應(yīng)值應(yīng)在儀器的線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件下,羥甲基糠醛的參考保留時間約為12 min。羥甲基糠醛標準物質(zhì)色譜圖和含有短甲基糠醛的蜂蜜樣品色譜圖參見附錄A中圖A.1、圖A.2 ,
4.5 平行試驗
按上述步驟,對同一試樣進行平行試驗測定。
4.6 空白試驗
按上述步驟,對10%的甲醇溶液進行測定。
4.7 添加試驗
每批樣品應(yīng)至少進行一個樣品的添加試驗。稱取10g試樣,精確至0.0lg,添加1.0mL羥甲基糠醛標準儲備溶液,加9.9mL甲醇溶解,其他步驟按試樣處理步驟進行。
5 精度
本部分的精密度數(shù)據(jù)是按照GB/T6379的規(guī)定確定的,其重復(fù)性和再現(xiàn)性的值是以95%的可信度來計算。
本方法中經(jīng)甲基糠醛添加濃度及其回收率的試驗數(shù)據(jù):
在添加量為1.0mg/kg時,平均回收率為93.78%;
在添加量為10.0mg/kg時,平均回收率為94.88%;
在添加量為40.0mg/kg時,平均回收率為95.76%;
在添加量為100mg/kg時,平均回收率為94.68%.
以上方法為501液相色譜儀檢測蜂蜜中羥甲基糠醛含量方法,詳情請登錄賽析科技 咨詢
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