農(nóng)藥殘留檢測試劑
乙酰膽堿酯酶抑制率法(GB/T 5009.199-2003)
1.相關(guān)試劑的配制及保存
緩沖劑:取1包緩沖劑倒入500mL蒸餾水或純凈水(建議使用哇哈哈純凈水)中搖勻溶解制成磷酸鹽緩沖劑,常溫保存。
酶粉:取1瓶酶粉加入10mL緩沖液搖勻溶解,使用時取100μL,0~5℃冷藏保存。
顯色劑:取1瓶顯色劑加入10mL緩沖液搖勻溶解,使用時取100μL,0~5℃冷藏保存。
底物:取1瓶底物加入10mL蒸餾水或純凈水搖勻溶解,使用時取100μL,0~5℃冷藏保存。
2.樣品提取
取2g蔬菜樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成1cm2左右的碎片,塊莖類取橫截面或取其表皮,放入取樣瓶中,加入10mL緩沖液,震蕩1~2min,靜置或過濾后上清液為待測樣品液。
3.操作步驟
(1)空白對照:取1支試管加入2.5mL緩沖液,然后加入酶液100μL和顯色劑100μL,搖勻,37℃恒溫靜置反應(yīng)15min加入100μL底物,搖勻后立即倒入比色皿放入儀器進(jìn)行測定。
(2)樣品檢測:取1支試管加入2.5mL待測液,然后加入酶液100μL和顯色劑100μL,搖勻,37℃恒溫靜置反應(yīng)15min加入100μL底物,搖勻后立即倒入比色皿放入儀器進(jìn)行測定。
4.結(jié)果判定
當(dāng)抑制率<50%時,表示樣品農(nóng)殘未超標(biāo);當(dāng)抑制率≥50%時,表示農(nóng)殘超標(biāo),需重復(fù)實驗,多次重復(fù)后仍顯示超標(biāo),建議使用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步的分析。
【注意事項】
緩沖試劑容易結(jié)晶,必須充分溶解后才能使用,建議用玻璃棒搗碎。
比色皿必須光面對準(zhǔn)光源,手拿磨砂面。
判斷儀器和試劑能否正常使用,請按以下操作:取一只試管,加入2.5mL緩沖液,分別加入酶、顯色劑,放置10min后加入底物,快速放到比色皿中,點對照檢測即可;數(shù)值應(yīng)當(dāng)在0.3~0.8之間。高于0.8可在酶試劑里加入1mL緩沖液。
從任何試劑瓶吸出的試劑,都不應(yīng)該再次射回試劑瓶內(nèi)。
5.包裝規(guī)格
酶、底物、顯色劑各1瓶,緩沖試劑2包。(可根據(jù)要求定制包裝規(guī)格)。