弓形蟲(chóng)IgM抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
僅供研究、不用于臨床診斷
產(chǎn)品介紹
弓形蟲(chóng)(Toxoplasma gondii,TO)感染人體引起弓形蟲(chóng)病,常造成眼、腦的損害,感染孕婦還可能造成畸胎甚至流產(chǎn)。檢測(cè)弓形蟲(chóng)抗體可輔助診斷弓形蟲(chóng)的感染。
本試劑盒采用固相間接ELISA法檢測(cè)人體血清中特異性IgM抗體。
試劑及用品
1. 預(yù)包被板條 | 48/96T; | 6. 樣本稀釋液(5號(hào)液) | 1支; |
2. 酶結(jié)合物(1號(hào)液) | 1支; | 7. 終止液(6號(hào)液) | 1支; |
3. 洗滌液(2號(hào)液) | 1支; | 8. 陽(yáng)性對(duì)照血清 | 1支; |
4. 底物(3號(hào)液) | 1支; | 9. 陰性對(duì)照血清 | 1支; |
5. 顯色液(4號(hào)液) | 1支; | 10. 使用說(shuō)明書(shū) | 1份; |
操作方法
- 樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清按1:200稀釋。陰、陽(yáng)對(duì)照不用稀釋。
- 加樣反應(yīng):樣本檢測(cè)孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各一孔,取陰性、陽(yáng)性對(duì)照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),空白對(duì)照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號(hào)液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號(hào)液)一滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
- 加酶反應(yīng):除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)二滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
- 顯色反應(yīng):每孔加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各一滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)一滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色)。
結(jié)果判斷
- 肉眼觀察:陰性對(duì)照接近無(wú)色,陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色,表示實(shí)驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性。
- 儀器判斷:以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長(zhǎng))讀取O.D值。待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.07時(shí)按0.07計(jì)算。
注意事項(xiàng)
- 試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
- 洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi),每次停放三十秒鐘,甩去孔內(nèi)液體。禁用自來(lái)水等其它水源。
- 為提高實(shí)驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,并對(duì)陰性對(duì)照測(cè)復(fù)孔以減少誤差。