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麥芽糖含量測定意義:
麥芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖類物質(zhì)在β-淀粉酶催化下的主要水解產(chǎn)物,再經(jīng)麥芽糖酶催化,則被水解成兩個(gè) D-葡萄糖分子。麥芽糖可用作甜味劑,是一種廉價(jià)的營養(yǎng)食品,容易被人體消化和吸收,廣泛應(yīng)用于食品行業(yè),測定食品中麥芽糖含量具有重要意義。
麥芽糖含量測定原理:
利用示差折光檢測器測定麥芽糖含量。
麥芽糖的提取:
1、組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):超純水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.2 g組織,加入 2mL 超純水),勻漿,倒入 2mLEP 管中,8000g 4℃離心 10 min,取上清液,調(diào) PH 值至 5-9,水系針頭式過濾器過濾后待測。
2、液體樣品:取 2mL 液體樣品,調(diào) PH 至 5-9,水系針頭式過濾器過濾后待測。
麥芽糖含量標(biāo)準(zhǔn)品的配制:
麥芽糖含量測定操作步驟:
1.開啟電腦、泵、檢測器和自動(dòng)進(jìn)樣器,用超純水沖洗儀器,沖洗體積為100mL,必須保 證整個(gè)線路中充滿水,不能把有機(jī)相帶入色譜柱。
2.安裝上色譜柱,放入柱溫箱,設(shè)置流速0.2 mL/min,沖洗5min后,設(shè)置柱溫為85℃,待
溫度升到所需溫度后,逐漸提高流速至0.6mL/min,并注意柱壓不超過1000psi。
3.設(shè)置進(jìn)樣量 10 μL,流速 0.6 mL/min,保留時(shí)間 15min。待流速達(dá)到 0.6mL/min 后,查看基線。
4.待基線穩(wěn)定后上樣檢測,先加入標(biāo)準(zhǔn)品 10 μL,麥芽糖的保留時(shí)間在 9min 左右,(儀器和檢測環(huán)境不同,保留時(shí)間有差異),計(jì)算不同濃度的麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積;加入樣品 10 μL, 在相應(yīng)保留時(shí)間處檢測麥芽糖的峰面積。
5.測定結(jié)束后,調(diào)整流速為0.2mL/min,關(guān)閉柱溫箱的加熱系統(tǒng);待柱溫降到40℃以下,
停止流動(dòng)相。
麥芽糖含量的計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)計(jì)算麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品麥芽糖含量。
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