利用斑馬魚模型評價(jià)多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用

利用斑馬魚模型評價(jià)多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用【評價(jià)原理】

中一個普遍存在的問題就是多藥耐藥。在引起的腫瘤耐藥機(jī)制中，腫瘤細(xì)胞的P-糖蛋白（P-gp）表達(dá)水平升高是主要機(jī)制之一。P-gp是一種細(xì)胞外轉(zhuǎn)運(yùn)子，P-gp表達(dá)水平升高會導(dǎo)致進(jìn)入腫瘤細(xì)胞會很快被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞內(nèi)的藥濃度達(dá)不到殺死腫瘤細(xì)胞的濃度，進(jìn)而產(chǎn)生耐藥性。

讓正常斑馬魚攝入熒光底物（呈紅色），由于P-gp的存在，正常斑馬魚將熒光底物泵出體外，殘留在體內(nèi)的熒光底物很少；而用P-gp抑制劑環(huán)孢菌素A處理后，P-gp的活性受到抑制，P-gp熒光底物不能被排出，殘留在斑馬魚體內(nèi)的熒光底物增多。若某種藥物能夠增加熒光底物在斑馬魚體內(nèi)的存留，則其可能是潛在的P-gp抑制劑。

利用斑馬魚模型評價(jià)多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照組和服用P-gp抑制劑組。斑馬魚提前P-gp抑制劑數(shù)小時(shí)，而正常斑馬魚和服用P-gp抑制劑組都攝入了等量的熒光底物（熒光底物通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。一定時(shí)間后，觀察斑馬魚卵黃囊熒光底物的殘留情況（卵黃囊熒光強(qiáng)度）來體現(xiàn)P-gp抑制劑逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚多藥耐藥表型圖

可以看到，服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮，說明其對P-gp有顯著的抑制作用。

【評價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn)，服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮，說明其對P-gp有顯著的抑制作用。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了環(huán)孢菌素A、維拉帕米具有逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用。