詳細(xì)介紹
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)保護(hù)視力功效【評(píng)價(jià)原理】
隨著電子產(chǎn)品的廣泛使用,用眼的時(shí)間和強(qiáng)度已遠(yuǎn)超過去,用眼過度引起一系列視力問題。研究表明,高度近視、視網(wǎng)膜疾病、白內(nèi)障、眼干燥關(guān)節(jié)綜合征均與眼細(xì)胞凋亡相關(guān)。斑馬魚的眼部血管結(jié)構(gòu)跟人非常相似,斑馬魚視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發(fā)斑馬魚眼細(xì)胞凋亡,模擬人的眼部疾病。
用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細(xì)胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,在熒光顯微鏡下可以觀察到。
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)保護(hù)視力功效【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯,模型對(duì)照組與服用眼保護(hù)劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。眼保護(hù)劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時(shí)攝入藍(lán)莓葉黃素酯之類的眼保護(hù)劑。
服用一段時(shí)間眼保護(hù)劑后,我們對(duì)斑馬魚整體做凋亡細(xì)胞特異性染色,觀察細(xì)胞凋亡,同時(shí)制作成病理切片觀察眼部的病理結(jié)構(gòu)變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚眼細(xì)胞凋亡表型圖
黃色虛線區(qū)域?yàn)檠?,綠色小點(diǎn)為凋亡細(xì)胞
可以看到,模型對(duì)照組的凋亡細(xì)胞較正常對(duì)照組明顯增多,而眼保護(hù)劑組凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞相似。
圖2. 眼部凋亡細(xì)胞病理切片
紅色箭頭指向凋亡細(xì)胞
從病理切片中也能看出來(lái),模型對(duì)照組出現(xiàn)較多的凋亡細(xì)胞,表現(xiàn)為細(xì)胞固縮、染色質(zhì)邊集,而眼保護(hù)劑組細(xì)胞和正常斑馬魚中形態(tài)相似。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),眼保護(hù)劑組斑馬魚眼細(xì)胞與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組的大面積細(xì)胞凋亡情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了藍(lán)莓葉黃素酯具有保護(hù)視力功效。