Stabilizor T1 生物樣本熱固化儀

背景：  

    蛋白質(zhì)組研究要得到準(zhǔn)確可靠的結(jié)果，很大程度上取決于樣品的前處理方法。保持樣品的新鮮性和穩(wěn)定性，即樣品是否反映目標(biāo)蛋白質(zhì)在活體內(nèi)的原始狀態(tài)尤為重要。一旦樣品從機體分離，調(diào)控平衡被打破，某些蛋白質(zhì)或多肽將很快發(fā)生離體降解，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的種類、含量和修飾快速變化，使得檢測到的部分蛋白質(zhì)或肽段實際上是高豐度蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)生的片段，而不是樣品中的原始蛋白質(zhì)（如下圖，小鼠下丘腦組織離體1-10分鐘的樣品發(fā)生了顯著的降解）。

    在細(xì)胞和組織表達(dá)的蛋白質(zhì)組中，發(fā)揮重要生理功能、研究意義和價值的蛋白質(zhì)通常是一些含量很小、穩(wěn)定性差的低豐度蛋白質(zhì)或多肽。隨著蛋白質(zhì)檢測技術(shù)的發(fā)展，檢測方法的靈敏度越來越高，也對樣品前處理方法提出了更高的要求，如何在處理樣品過程中保留這些蛋白質(zhì)或多肽就變得越來越重要。

    因此，采用一種快速、有效的樣品穩(wěn)定方法，盡量縮短樣品采集與穩(wěn)定之間的間隔時間并將樣品前處理（穩(wěn)定）過程標(biāo)準(zhǔn)化，對于蛋白質(zhì)研究具有重要意義。高質(zhì)量的樣品前處理有利于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，進(jìn)而增強分析結(jié)果的可靠性和可比性。

產(chǎn)品描述：

      Stabilizor（生物樣本熱穩(wěn)儀）為瑞典生物技術(shù)公司（Denator）潛心研發(fā)及改進(jìn)而成功推出的新型的生物樣品穩(wěn)定技術(shù)。該系統(tǒng)包含Stabilizor主機和樣品卡，用于解決蛋白質(zhì)離體降解的難題。Stabilizor 系統(tǒng)能快速、均勻、準(zhǔn)確的將熱量傳遞給樣品，破壞蛋白質(zhì)中的氫鍵，保留氨基酸鏈的共價肽鍵，即破壞蛋白質(zhì)的二級及以上結(jié)構(gòu)，保留一級結(jié)構(gòu)的完整性。這種不可逆的失活效應(yīng)將樣品中的各種酶類失活，從而將蛋白質(zhì)離體降解的程度降到。處理過程中無需添加輔助抑制試劑，也將后期分析的干擾因素降到了。

該技術(shù)起源于的瑞典 Uppsala 大學(xué)，課題組發(fā)現(xiàn)，由于神經(jīng)肽的豐度低、半衰期短，在依靠 LCMS 技術(shù)研究帕金森氏癥模型時其活性組分的信號難以捕獲到。后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，依靠熱穩(wěn)定技術(shù)能*阻斷生物組織樣本的自然變化，實現(xiàn)即刻以及性組織樣本的固化，保障后續(xù)針對蛋白質(zhì)、多肽、以及大小分子生物標(biāo)記物的高靈敏度、高準(zhǔn)確性、極近體內(nèi)（in vivo）、和原位（in situ）的分析，并依此推出了款生物樣本熱穩(wěn)儀產(chǎn)品，在包括制藥企業(yè)、的實驗室、大學(xué)、研究院及生物技術(shù)公司廣泛采用，并依此在 Gene、Cell、Nature等雜志發(fā)表學(xué)術(shù)論文近百篇。

典型用戶：

瑞典 Lund University、瑞士 ETH Zürich 的 Reudi Aebershold 實驗室、瑞典 Linkoping  大學(xué)、Finlａnd 的 Turku、美國哥倫比亞大學(xué)、英國曼徹斯特大學(xué)、英國 Proteome Science、英國  BioBank、美國 U Penn、美國癌癥中心、美國 CDC、比利時 Antwerp 大學(xué)醫(yī)院、德國 Lübeck 大學(xué)、美國普渡大學(xué)、澳大利亞 Livestock、中國首都醫(yī)科大學(xué)、丹麥 NovoNordisk、芬蘭 Turku 中心、愛爾蘭 Dublin 大學(xué)、日本國家癌癥研究院、荷蘭 Leiden 醫(yī)科大學(xué)、英國 St George Biomics 中心、美國科羅拉多大學(xué)、美國 Merck、法國 Sanofi、日本 Takeda、美國 Vanderbilt 大學(xué)、丹麥哥本哈根大學(xué)、芬蘭赫爾辛基大學(xué)、德國 Max-Planck 研究所、日本 Tokohuso 大學(xué)醫(yī)院、瑞典 Karolinska 研究院、耶魯大學(xué)、USAMRID、日本國立材料研究院、等等，用于腦、肝、胰腺、心、胸腺、等組織和異種移植、活組織檢查等方面的應(yīng)用。

其他應(yīng)用包括 Stabilizor™ 用于質(zhì)譜（LC-MS、MALDI-TOF、MALDI-Imaging）鑒定和定量蛋白質(zhì)、多肽、及翻譯后修飾；用于小分子的 MALDI-Imaging，研究藥物如脂質(zhì)或 ATP 等在組織中的分布和代謝；用于磷酸化修飾的研究，通過固化，鎖定磷酸化避免其持續(xù)性轉(zhuǎn)化；用于靶標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)分析和臨床蛋白質(zhì)學(xué)分析；用于 2D 凝膠電泳分析及后續(xù) LCMS 分析，鑒定蛋白質(zhì)在健康和疾病組織中的差異化表達(dá)；用于 Western Blot 分子生物學(xué)方法，利用抗體鑒定特殊蛋白質(zhì)及其磷酸化。Stabilizor™ 在臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究中的內(nèi)源性多肽和磷酸化、癌癥研究中的蛋白質(zhì)磷酸化修飾、肥胖癥及糖尿病的多肽如胰島素及其他荷爾蒙激素和磷酸化蛋白質(zhì)、心血管疾病研究中的蛋白質(zhì)表達(dá)及磷酸化的作用等，均有上乘表現(xiàn)。

原理：

      Stabilizor 采用精密自動控溫加熱，通過快速熱傳導(dǎo)對酶蛋白進(jìn)行不可逆改型及酶失活，保存機體內(nèi)部真實的原生態(tài)，防止多肽、蛋白和小分子采樣后的進(jìn)行性退化。熱滲透可快速（30秒）覆蓋整個鮮活組織或液氮急凍過的組織或細(xì)胞培養(yǎng)液，均勻和充分，使樣本不再遺留活性酶或在后續(xù)實驗中發(fā)生酶激活，保障組學(xué)（如質(zhì)譜等等）或生物測定手段（如 Western Blot 等等）檢測到更多和新型的內(nèi)源性肽、蛋白質(zhì)，保鮮蛋白質(zhì)的磷酸化修飾，真實反映大、小分子或代謝物的初始狀態(tài)。

    固化后的樣品可于當(dāng)日在室溫下進(jìn)行組學(xué)分析或生物學(xué)測定，也可利用儲存卡冷凍，避免存儲及運輸中可能的污染。專業(yè)的試劑盒有助于多肽、激酶以及磷酸酶的固化，確保酶*失活和后續(xù)分析測定結(jié)果的高度可靠性和重現(xiàn)性。

    熱穩(wěn)儀操作非常簡便，使用者僅僅針對新鮮或冷凍的待測樣品選擇相應(yīng)的處理程序，記時、取樣，將存放了新鮮或冷凍組織樣品的儲存卡放入進(jìn)樣滑板，儲存卡將被自動引入加熱區(qū)，綠燈亮起時即表示固化結(jié)束。熱固化儀非常人性化的設(shè)計是科學(xué)家和實驗室技術(shù)人員非常喜愛此項技術(shù)的原因。不論是新鮮的還是經(jīng)提前急凍過的組織樣品，均能以 Stabilizor T1 進(jìn)一步熱固化，完善樣品預(yù)處理方案和輔助圓滿解決蛋白質(zhì)的磷酸化修飾表征、內(nèi)生肽表征、藥物代謝表征等復(fù)雜流程中的生物組織處理不夠穩(wěn)定和不能重現(xiàn)的生物學(xué)難題。

功能優(yōu)勢： 

      和傳統(tǒng)的固化方法如急凍法、抑制劑引入法、微波固化法等技術(shù)相比，使用 Stabilizor 系統(tǒng)可去除蛋白酶和磷酸酶活性，防止蛋白質(zhì)降解。降低蛋白質(zhì)組復(fù)雜性，減少高豐蛋白質(zhì)降解片段的干擾，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的內(nèi)源性蛋白質(zhì)/多肽生物標(biāo)記物的可能性。Stabilizor處理樣品具有穩(wěn)定性、標(biāo)準(zhǔn)化和可追溯性，更易得到高質(zhì)量的分析數(shù)據(jù)和“更真實、更原位、更快速"。 其創(chuàng)新點包括：

1) 綠色：純物理的樣品穩(wěn)定方法，不需使用干擾后期分析的酶抑制劑；無毒

2) 廣譜：可固化所有含水的組織、性！無論是新鮮的還是急凍過的

3) 快速：處理時間短，一般在一分鐘以內(nèi)即可將樣品中的各種酶類失活，快速、均勻、充分

4) 精確：激光測量樣本尺寸，特殊算法得出蛋白變性所需的準(zhǔn)確能量

5) 智能：自由調(diào)節(jié)用于壓縮樣品的壓力；真空抽吸避免空氣干擾

6) 重現(xiàn)：樣品采集和儲存過程標(biāo)準(zhǔn)化，結(jié)果可靠，數(shù)據(jù)更具可比性，便于進(jìn)行如比較蛋白質(zhì)組研究

7) 持久：保留樣品在活體內(nèi)蛋白質(zhì)的磷酸化和其它翻譯后修飾的真實狀態(tài)，保留不穩(wěn)定、易降解的低豐度蛋白質(zhì)

8) 靈敏：避免了樣品中低豐度蛋白質(zhì)或多肽受高豐度蛋白質(zhì)降解片段的干擾，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)、多肽以及它們的修飾形式

9) 便捷：性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，樣品經(jīng)穩(wěn)定后，即可在常溫下、從容地、進(jìn)行制備操作，無需擔(dān)心酶對蛋白質(zhì)、多肽的降解或改變它們的修飾形式

10) 準(zhǔn)確：降低蛋白質(zhì)組的復(fù)雜程度，縮小動態(tài)范圍，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的蛋白質(zhì)或多肽生物標(biāo)記物的可能性

11) 簡單：使用方便，在采樣的同時即可穩(wěn)定樣品，縮短樣品離體降解的時間，避免樣品污染

12) 實用：使 用 MALDI-MSI、Western Blot、nanoLC-MS 檢測目標(biāo)蛋白質(zhì)或多肽，Stabilizor 是目前有效的樣品穩(wěn)定方法

13) 溯源：所有參數(shù)均以電子記錄和可U盤儲存，方便管理和方法轉(zhuǎn)移

主要用途包括但不限于：

快速固化新鮮或急凍過的組織樣本或細(xì)胞培養(yǎng)液或干血斑

蛋白質(zhì)磷酸化修飾的表征

內(nèi)生肽表征

藥物代謝表征