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　　黃花蒿(Artemisia annua L.),又名香蒿、青蒿、臭蒿、犱蒿等，是雙子葉植物綱、菊科、蒿屬一年生草本植物，揮發(fā)性氣味特異，具有清熱解暑、抗瘧疾、退黃等功效。黃花蒿提取物含有多種活性成分，包括倍半萜類、黃酮類、揮發(fā)油類、香豆素類及其他等。青蒿素主要來源于傳統(tǒng)中藥黃花蒿，研究表明其具有強大的抗瘧作用，是我國唯一能獲得國際認可的抗瘧藥物。但是近年來隨著研究的深入，青蒿素其它作用也越來越多被發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用研究，大量的研究表明青蒿素及其衍生物不僅具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、預(yù)防骨質(zhì)疏松、抗菌作用，抗病毒作用也同樣矚目。
 

　　不同產(chǎn)地、不同生長時期的黃花蒿，青蒿素含量有所區(qū)別，黃花蒿的規(guī)范栽培受到了重視，因此制定規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)進行測定黃花蒿中青蒿素含量對黃花蒿的品質(zhì)控制具有重要的意義。本標(biāo)準(zhǔn)主要針對黃花蒿中青蒿素的測定進行研究，從前處理方法、測試方法進行優(yōu)化，形成一套完整的測試流程，檢出限低、檢測時間短、穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確度高。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)的制定，除了能準(zhǔn)確測定黃花蒿中青蒿素的含量，作為黃花蒿質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)之一，也為其它植物中青蒿素的測定提供重要參考價值。
 

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法規(guī)程內(nèi)容編制。
 

　　本文件規(guī)定了黃花蒿中青蒿素含量的液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜測定方法。本文件適用于黃花蒿中青蒿素含量的測定，其它植物可參照執(zhí)行。
 

　　原理：
 

　　用乙腈超聲提取試樣中的青蒿素，采用基質(zhì)分散固相萃取劑凈化，液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜進行測定，外標(biāo)法定量。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧(ESI)離子源。
 

　　2.離心機：4000 r/min。
 

　　3.分析天平：感量 0.0001g。
 

　　4.超聲波。
 

　　5.烘箱。
 

　　分析步驟：
 

　　1.提取
 

　　稱取樣品0.1g(精確至0.001g)于50mL聚丙烯塑料離心管中,加入25mL乙腈，室溫振蕩3min， 30℃超聲30min，4000r/min離心5min，取上清液。
 

　　2.凈化
 

　　取1mL上述上清液于預(yù)先稱有20mg PSA和50mg C18的2mL聚丙烯塑料離心管中，振蕩1 min，在4000 r/min離心5min。取上清液過0.22μm有機微孔濾膜。濾液供液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜測定。
 

　　定量測定：
 

　　根據(jù)試樣中被測物的含量情況，選取待測物的響應(yīng)值在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)的濃度進行測定，如超出儀器線性響應(yīng)范圍應(yīng)進行稀釋。并且保證標(biāo)準(zhǔn)工作液和待測液中的青蒿素響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。在上述色譜條件下青蒿素的參考保留時間為 3.8 min，標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖見附錄B。
 

　　結(jié)果計算和表述：
 

　　液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜法測定試樣中青蒿素采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量結(jié)果按公式計算，計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值。
 

　　更多詳情請見附件。