USB™ CycleSeq™ Thermostable DNA Polymerase

USB™ CycleSeq™Thermostable DNA Polymerase 是一種熱穩(wěn)定的 DNA 聚合酶，不含核酸外切酶，以顯著高于標(biāo)準(zhǔn)熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶的效率摻入 ddNTP。這樣可以得到更均衡、更易于讀取的序列條帶模式，使序列異常更容易識別。

USB CycleSeq Thermostable DNA Polymerase 可替換 ThermoSequenase DNA 聚合酶，因?yàn)閮煞N酶都可摻入修飾核苷酸（參見圖 1）。

CycleSeq DNA 聚合酶與 Thermo Sequenase DNA 聚合酶一樣，包括嗜酸熱原體無機(jī)焦磷酸酶 (TAP)。TAP 具有熱穩(wěn)定性，可將焦磷酸鹽轉(zhuǎn)化為正磷酸鹽，這在產(chǎn)生焦磷酸鹽的循環(huán)測序反應(yīng)中是一個有用功能。

USB CycleSeq Thermostable DNA Polymerase 適用于循環(huán)測序（Sanger 測序），因?yàn)樗僧a(chǎn)生均勻條帶強(qiáng)度的序列數(shù)據(jù)，從而獲得更長、更準(zhǔn)確的序列讀段。它也可用于 SNP 基因分型過程中的引物延伸方案。

來源：
重組

純度：
大于 95%（SDS-PAGE 測定）。

儲存緩沖液：
20 mM Tris-HCl（pH 值 8.5）、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、100 mM KCl、0.053 單位/μl 嗜酸熱原體無機(jī)焦磷酸酶、50% 甘油和穩(wěn)定劑。

測定條件：
反應(yīng)混合物包含 25 mM TAPS（pH 值 9.3）、50 mM KCl、2 mM MgCl₂、1 mM Β-ME、200 μM dATP、200 μM dGTP、200 μM dTTP、100 μM dCTP、0.05 μL [α33P] dCTP (10 μCi/μL)、400 μg/mL 活化 DNA 和 CycleSeq 熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶。在 74deg;C 下孵育 10 分鐘后，測定酸不溶性材料（50 μL 反應(yīng)體積）。

單位定義：
一單位酶定義為在標(biāo)準(zhǔn)測定條件下 74°C 30 分鐘內(nèi)催化 10 nmol dNTP 摻入酸不溶形式所需的酶量。

濃度：
32 單位/μL

功能試驗(yàn)：
功能試驗(yàn)符合或超出染料引物測序使用的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。放行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基于序列長度、條帶強(qiáng)度和序列質(zhì)量。序列中還必須不含干擾序列解讀的背景條帶。