利什曼原蟲黑熱IgG抗體檢測試劑盒說明書
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【檢測原理】
利什曼原蟲IgG/IgM抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知 LSM-Ab 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將 LSM-Ab 和生物標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物 A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中 LSM-Ab 的濃度呈比例關(guān)系。
【自備材料】
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
【安全性】
避免直接接觸終止液和底物 A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
【操作步驟】
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入好后的標準品 50ul 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50ul 于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入 50ul 的生物標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 1 小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩 30 秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入 80ul 的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 30 分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩 30 秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物 A、B 各 50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 10 分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入 50ul 終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
【寄生蟲檢測試劑盒】
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